食品中阪崎肠杆菌的鉴定计数.docVIP

　　品种名称：阪崎肠杆菌显色培养基 　　阪崎肠杆菌显色培养基用途： 　　供婴儿奶粉以及其它食品中阪崎肠杆菌的鉴定和计数。 　　阪崎肠杆菌显色培养基使用原理： 　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;胆盐抑制革兰氏阳性菌，氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生;显色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D葡萄糖苷与阪崎肠杆菌中的α-葡萄糖苷酶发生反应，水解底物，释放出5-溴-4-氯-3-吲哚基显色基团，在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。 　　阪崎肠杆菌显色培养基配方(每升)： 　　蛋白胨 11g 　　牛肉膏粉 5g 　　氯化钠 5g 　　柠檬酸铁铵 　 1g 　　硫代硫酸钠 1g 　　胆盐 1.5g 　　5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷 0.1g 　　琼脂 15g 　　最终pH 7.3±0.2 　　阪崎肠杆菌显色培养基使用方法: 　　1. 取瓶内干粉39.6克，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min;冷却至50℃，摇匀倒平板。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光，4℃)。 　　2. 取样品333克按MPN三管法分别取100克、10克和1克分装在各三个2000ml、250ml和100ml的三角瓶中，在三角瓶中已装有经45℃预热的9/10(样品为1/10)的无菌蒸馏水或缓冲蛋白胨水，摇匀，在36℃培养18-22小时(SN和FDA方法)。 　　3. 各取10ml上述悬浮液加到装有90mlEE肉汤(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中，在36℃/44℃增菌培养18-22小时。 　　4. 用划线或涂布法把混匀的肉汤接种到阪崎肠杆菌显色琼脂平板上，35-37℃培养18-24小时。 　　5. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验，对疑似阪崎肠杆菌菌落进行生化鉴定。 　　阪崎肠杆菌显色培养基质量控制： 　　阪崎肠杆菌显色培养基倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表： 　　质控菌株　　　　　　　　　接种量 (cfu/平板)　生长情况　　　菌落色泽 　　阪崎肠杆菌ATCC51329　　　　30 – 300　　　　　良好　　　　绿-蓝绿色 　　普通变型杆菌HK7132　　　　30 – 300　　　　　良好　　　　　灰黑色 　　粘质沙雷伯氏菌HK7121　　　 5000　　　　　　　不长　　　　　　- 　　粪肠球菌ATCC29212　　　　5000　　　　　　　不长　　　　　　　- 　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。 　　规 格：可配置1L的培养基干粉。