第一章_植物工厂化育苗的工厂与设备详解.pptVIP

3.激素母液的配制 * 生长素类、赤霉素类及脱落酸等用95％乙醇溶解； 细胞分裂素类用1N HCl或1N NaOH溶解。 通常激素母液浓度生长素类为0.1~0.5 mg/ml, 细胞分裂素母液浓度为0.2~1.0 mg/ml. 二、培养基的配制 水 药品 糖 琼脂 混合 加热溶解 调整pH 玻璃器皿 水洗 干燥 分装 灭菌 封口 冷却 接种 1、取出母液并按顺序放好。将洁净的各种玻璃器皿如量筒、容量瓶、移液管、移液枪和玻璃棒等放在指定位置； 2、取一只容量瓶，放入配制培养基总量的1/3左右纯水，将母液按顺序加入，并不断搅拌； 3、加入植物生长调节剂后定容； 培养基的配制的具体步骤： 4、将定容的培养基倒入容器中，加入蔗糖和琼脂，并加热使其完全溶解； 5、调整pH； 6、将培养基分装倒培养器皿中，封好瓶口； 7、灭菌，用高压锅灭菌（121℃，15～20min）或过滤除菌； 8、灭菌后待高压锅温度下降到50℃以下时，便可以取出、冷却凝固后待用。 * * 三、培养基的保存 配制好的培养基一般要在室温、黑暗且清洁的地方放置3～5天再使用。 保存时间太久，培养基可能会污染、脱水、易分解的成分会发生分解，培养基成分会发生较大的变化。 每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。 四、培养条件 * 温度 光照 湿度 气体 培养基的渗透压 pH值 植物材料一般最适温度在25±2℃之间 环境条件 光强： 1000~6000 lx 一般情况下，培养器内相对湿度应达100%，培养室内环境的相对湿度在70%~80% 氧气是愈伤组织生长所必需的 调节渗透压常常从糖入手 植物组织培养时培养基的pH值大多在5.0－6.5 光质：影响细胞分裂和器官分化 光周期：光照16h，黑暗8h 第三节 基本操作 一、洗涤 1、玻璃器皿洗涤 新购置玻璃器皿 1%稀HCl 浸渍12h 洗衣粉洗涤 清水冲洗 晾干备用 已用过的玻璃器皿 2、塑料用品洗涤 塑料器皿 2%NaOH浸泡12h 清水冲洗 2%—5%盐酸浸泡30min 清水冲洗 蒸馏水冲洗 晾干备用 * 3、金属用品洗涤 热洗衣粉水洗净 冲洗 擦干 * * 1.灭菌方法： （1）物理方法： 物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理除菌、过滤、离心、沉淀等 （2）化学方法： 消毒剂、抗菌素灭菌 * 二、消毒灭菌 2、灭菌 （1）培养基灭菌：高温高压湿热灭菌法 压力在9.8×104—10.8×104Pa 温度在121℃ 灭菌20—30min （2）玻璃器皿灭菌：蒸汽高压消毒灭菌 干热消毒灭菌 * 饱和蒸汽压力与其对应的温度 饱和蒸汽压力 温度（℃） 饱和蒸汽压力 温度（℃） kg/cm2 1b/m2 kg/cm2 1b/m2 0.0 0.141 0.281 0.442 0.563 0.703 0.844 0.984 0 2 4 6 8 10 12 14 100 103.6 106.9 109.8 112.6 115.2 117.6 119.9 1.000 1.055 1.125 1.266 1.406 1.543 1.681 15 16 18 20 22 24 30 50 121.0 122.0 124.1 126.0 127.8 129.6 134.5 147.6 * （3）塑料器皿灭菌： 多采用高压蒸汽消毒灭菌 （4）金属用具灭菌：灼烧灭菌 浸入95%酒精，后置于酒精火焰上灼烧，冷却后使用 （5）过滤灭菌： 一些生长调节剂，如赤霉素、玉米素、脱落酸和某些维生素。 * （6）接种室灭菌 空气消毒灭菌 接种室 超净工作台 紫外灯照射 70%—75%的酒精擦洗 培养材料的接种 紫外灯照射 * （7）外植体灭菌 流水冲洗10—20min或更长时间 70%—75%酒精中浸泡30s 0.1%—0.2%氯化汞液中浸泡10min左右 蒸馏水冲洗4—5次 在10%的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡30min左右 备用 * 常用消毒剂消毒灭菌比较表 消毒剂 使用浓度（%） 去除难易 消毒时间（min） 效果 次氯酸钙 次氯酸钠 漂白粉 溴水 过氧化氢 升汞 酒精 抗生素 硝酸银 9~10 2 饱和溶液 1~2 10~12 0.1~1 70~75 4~5（mg