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农药的生物测定 一、农药生物测定定义 指在一定条件下利用靶标生物测定其对某些化合物的反应的量度,进而鉴别某种化合物生物活性的基本技术与方法。 研究化合物、靶标生物和反应强度三者关系的一项专门技术。 一般包括室内毒力测定和田间试验 靶标生物:通常指有害生物,包括昆虫、螨类、病菌、杂草、鼠类等。包括这些生物的整体或离体的组织、细胞等。 待测化合物:可以是已经成为农药的化合物,包括杀虫(杀螨)剂、除草剂、杀菌剂、杀鼠剂、杀线虫剂乃至卫生杀虫剂等;也可以是待筛选的化合物(已知物和未知物)。 生物反应:指靶标生物对杀虫、杀菌、除草等作用的反应,可以延伸为凡是干扰破坏有机体正常生长、发育、行为、代谢等效应的反应,如植物生长调节、昆虫生长调节、信息传递物质等。 生物反一般用死亡率、抑制率、反应率等指标来表示。如果有,则这个药物或化合物对靶标生物有生物活性,如果不产生效应,则这个药物或化合物对靶标生物就没有生物活性。 为什么要进行生物测定? ? 二、农药生物测定的基本内容 (1)供试对象的准备(包括靶标生物的饲养和待测化合物的选择,也包括组织培养、细胞培养、药剂配制、剂量计算等内容); (2) 生物测定的操作技术与方法(包括室内生测、小区实验和田间药效实验三个方面); (3)影响农药生物测定的因素分析(药剂、生物体、环境、操作方法); (4)农药生物测定结果评价与表达(用数理统计的方法得到一个恰当的结果来描述一个效果)。 三、试验设计的基本原则 1、要控制影响因素 上面我们已经大致分析了影响农药生物测定的因素,由于这些因素很多,在不同的因素条件下会产生不同的效果。 设效果为y=a+b1x1+b2x2+b3x3+…….bnxn。这样是一个复杂的偏回归关系。这不是我们生物测定的目的,我们的目的是为了寻求生测效果与药剂剂量之间的关系,即y=a+bx 其中,y是死亡率的几率值,而x则为剂量对数。这样很清楚明了。如果不控制其它因素,便无法得到这一回归式。 不过目前,已经有人尝试寻求多元的回归关系,这样可能更切合实际一些。如死亡率与温度、时间等的关系。 2、必须设立对照 设立对照的目的是为了消除自然因素而导致的试虫死亡。对照组有几种情况: 空白对照:即完全不处理或仅以清水处理 溶剂对照:即用不同有效成分的溶剂或乳化剂等作对照 标准药剂对照:标准药剂是指在生产中对某种目标昆虫常用的有效药剂可用之同待测农药相比。 试验时,要根据测定的需要,选择采用的对照。但一般情况下,如果选择标准药剂对照,则还需要选择溶剂对照和空白对照补充。 3、必须设立重复 一个原因:生物测定本身不是针对某一个昆虫,而是对昆虫的群体而言,是指某一个待测群体的综合反应,单个处理不足以反映实际情况。 另一个原因:从生物统计理论上讲,增加重复次数,减少每个重复的生物个体是减少试验误差的一个方法。 第三个原因:有一定的重复便于作精确的统计分析。 一般重复3次,每个处理20—50头试虫,田间试验的重复次数以3—5次为宜。 4、供试的目标昆虫要统一一致(室内毒力测定) 尽量选用农作物害虫。应在同一条件下饲养,或采自田间同一环境条件下,在生理下、发育上应尽量一致。 一般有三个条件:一是易于采集、生产上常见;二是易于饲养,便于获得同一群体;三是繁殖力比较强,可提供大量虫源。 需要注意的是:标准目标昆虫是用来做药剂筛选和毒力指示用的。目标昆虫,则是用来测定某种药剂对其作用效果的昆虫。 四、杀虫剂的生物测定 1、目标昆虫对药剂处理的反应 受药剂种类、剂量、处理时间、处理条件等影响,目标昆虫在生测过程中可表现出不同的反应症状。有长期症状也有短期症状。 (1)生长发育迟缓; (2)繁殖力降低; (3)不能正常蜕皮 (4)出现畸形; (5)击倒:昏倒; (6)中毒:身体扭曲、抖动等 (7)麻痹:没有死,但也没有反应; (8)拒食:常常是由于局部麻痹造成的;另外,拒食也可能与气味、事物的颜色等有关。 (9)死亡:心脏停止跳动--死亡常指个体,指群体则为死亡率--与对照比较,消除误差用校正死亡率。 2、生物效应的表达 (1)毒力:毒力是指药剂本身对不同生物发生直接作用的性质和程度。一般是在相对严格条件下,室内用标准生物测定的药剂对供试生物反应的量度。 (2)药效:是在田间或接近田间的条件下所测定的药剂对生物的作用效果。不同剂型、不同寄主植物、不同有害生物、不同的施药方法以及各种田间环境因素都会影响到药效的大小。 (3)反应率:包括所有出现症状的反应情况(前面介绍的几种情况) 一般都是用死亡率表示; 死亡率%=死虫数/试虫数×100% 死亡率从广义
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