天然药物化学成分的提取方法解决方案.ppt

色谱柱(分离柱) 色谱柱:色谱仪的核心部件。 柱材质:不锈钢管或玻璃，内径3-6毫米。长度可根据需要确定。 柱填料:粒度为60-80或80-100目的色谱固定相。 应用举例 定量分析： a. 色谱峰的测量:以峰的起点和终点的联线作为峰底。从峰高极大值对时间铀作垂线，对应的时即为保留时间。从峰顶至峰底间的线段即为峰高。 b. 计算:由色谱峰量出各组分的峰高，然后在各自的校准曲线上查出相应的待测物浓度。 定性结果： 根据标准谱图各组分的保留时间确定被测试样中出现的组分数目和组分名称。 苯系物气相色谱图 气相色谱分析的主要特点 １．高效能．是指一般色谱柱都有几千块理论板，毛细管柱可达10５－10６块理论班。因而可以分析沸点十分相近的组分，和极为复杂的多组份混合物。例如，用毛细管，可以分析轻油中150个组份。２．高选择性．是指固定相对性质极为相似的组份，如同位素，烃类的异构体等有较强的分离能力。主要通过选用高选择性的固定液。 ３．高灵敏度．指用高灵敏度的检测器可检测出10-11－10-13克的物质。因此可用于痕量分析。 ４．分析速度快．一般分析一次用几分钟到十几分钟。某些快速分析中，一秒钟可以分析若干份。色谱法易的操作与处理都自动化．速度很快。５．应用范围广．气象色谱法可以分析气体和易挥发的或可以转化为易挥发的液体和固体。也可以分析无机物，高分子，生物大分子，而且应用范围正在日益扩大！　 气相色谱法不足之处是试样需加热气化，不适宜分离高沸点、热稳定性差、极性大的化合物。 中药中挥发油类成分因其沸点低、易挥发，故气相色谱法特别适宜对其进行分离鉴定和含量测定。 气相色谱的应用 高效液相色谱仪器（HPLC） high performance liquid chromatograph 流程及主要部件 高效分离柱 柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。 发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。 高效液相色谱法的特点与应用 特点：高压、高效、高速 适用于高沸点、热不稳定的有机物及生化试样的高效分离分析方法。 天然药物化学成分结构测定的一般程序和方法 （一）纯度测定 1．结晶均匀、一致。 2．熔点明确、敏锐（0.5-1.0℃） 3．TLC (PPC):三种以上不同展开剂展开，均呈现单一斑点。 4．HPLC、GC也可以用于化合物纯度的判断。 （二）波谱在结构测定中的应用 1、红外光谱（IR) 化合物用量只需5-10微克， 测定范围在500~4000cm-1, 有两个区： 一个是指纹区在1000cm-1以下，每个化合物有自己的特征指纹图谱； 另一个是特殊功能区，在1000~ 4000cm-1 ，可以确定羰基、苯环、羟基等功能基。 2、紫外光谱（UV） ?? 只有在分子结构中具有共轭体系，即在分子中具有产生π-π 、n-π跃迁和某些n-σ跃迁的化合物才能在紫外光区产生紫外吸收光谱。 ?? 可根据紫外吸收光谱的位置及吸收峰的数目，可初步推测化合物的不饱和部分结构。 3、核磁共振(NMR) （1） 1H-NMR: 提供不同种类氢原子的情况。给出氢的数目、种类、相邻基团的结构。可提供的结构信息参数，主要为化学位移(δ), 偶合常数(J)及质子数。 （2） 13C-NMR: 提供碳原子的情况。可提供的结构信息参数，主要为化学位移、异核偶合常数(JCH)及弛豫时间。 ?? 4、质谱(MS) ?? 测定有机分子的分子量。正确判断离子峰，提供分子量。分析碎片离子，推断结构信息。 ?? 常用的有：电子轰击质谱（提供分子离子峰和碎片离子峰）；场解析质谱（可得到明显的分子离子峰）等。 思考题 1．何谓有效成分及有效部位，二者有何区别？ 2．中药化学成分提取的方法都有哪些？ 3．二氧化碳超临界萃取法提取中药化学成分的特点及适用范围 4．简述溶剂提取法的关键及选择溶剂的依据。 5．色谱技术在中药化学成分研究中有何应用。 6．水作为常用的提取溶剂，在化学成分提取方面的特点如何 7．两相溶剂萃取法的分离依据为何?怎样选择萃取溶剂。 8．何谓系统溶剂分离法，它在中药化学成分研究方面有何意义。 9．何谓铅盐沉淀法，其分离特点如何 10．简述水提醇沉法和醇提水沉法在中药化学成分提取分离方面有何异同 11．聚酰胺色谱的分离原理及在化学成分分离方面的特点 12．比较硅胶与氧化铝在化学成分鉴别方面的特点如何 13．离子交换树脂包括那些类型，在化学成分分离方面有何特点 14．大孔吸附树脂在化学成分的分离、纯化方面有何特点 15．简述葡聚糖凝胶色谱的分离原理及适用范围 16．简述结晶法分离、精制化学成分的工艺流程，并指出其关键所在 17．单体化合物纯