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【KS5U名校推荐】河南省郑州市郑州一中2015-2016学年上学期人教版生物选修一第三章第一节学案菊花组织培养学案
课题1 菊花的组织培养
学习目标
1.说明植物组织培养的基本原理。
2.学习植物组织培养的基本技术。
3.进行菊花或其他植物的组织培养。
自主探究
一、植物组织培养的理论基础
当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时,在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株(即细胞全能性)。
植物组织培养的相关概念和基本过程
植物组织培养的相关概念
(1)细胞分化:植物的个体发育过程中,细胞在__________、__________和__________上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因__________的结果。
(2)细胞的全能性:__________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。
(3)愈伤组织:由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织,就叫愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种__________的呈无定形状态的__________。
(4)脱分化:由__________的植物组织或细胞产生__________的过程,称为脱分化,又叫去分化。
(5)再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成__________,这个过程叫做再分化。
(6)外植体:用于离体培养的植物器官或组织片段。
植物组织培养的基本过程
移植
——→试管苗———→完整的植物体
3.植物体细胞发育成完整植株(表现出全能性)的条件。
脱离原来所在植物体(离体)、营养供给、激素控制、无菌条件、适宜的温度、PH和光照等。
影响植物组织培养的因素
1.内部因素:材料因素的影响。不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。同种植物材料,__________ ,__________ 等也会影响实验结果。菊花的组织培养,一般选择 __________的茎上部新萌生的侧枝。
2.外部因素:(1)营养条件 常用的是__________ 培养基,其主要成分包括: __________,如_____________________________;__________ ,如______________________________ ;__________ 等。
(2)植物激素 植物激素中__________ 和__________ 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。____________________、____________________ 以及__________ 等,都会影响实验结果。
(3)环境因素 __________ 、__________ 、 __________等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养,一般PH控制在 __________ ;温度控制在 __________ ;每天用日光灯照射__________小时。
【思考】(1)MS培养基中,各种营养成分各有什么作用?与微生物培养基的配方相比,有什么不同?
(2)生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响?
①按照不同的顺序使用这两类激素,会得到不同的实验结果。
使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但细胞不分化 先使用细胞分裂素,后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 分化率提高 ②当同时使用这两类激素时,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。
生长素用量比细胞分裂素用量 植物细胞的发育方向 比值高时 有利于根的分化、抑制芽的形成 比值低时 有利于芽的分化、抑制根的形成 比值适中时 促进愈伤组织的生长
四、实验操作过程
1.制备MS固体培养基
实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备
(1)配制各种母液。
配制母液时,大量元素浓缩__________ ,微量元素浓缩__________ 。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。
(2)配制培养基。
配制1LMS培养基时,将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水,加热熔化,然后加入蔗糖30g,依次加入母液,定容至1000mL。__________,然后分装到锥形瓶中,每瓶分装__________。
(3)灭菌。高压蒸汽灭菌
2、外植体消毒
选取菊花茎段时,要取 ____________________。
无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时,一方面要考虑_______________;另一方面还要考虑植物材料的__________。不同
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