第一节基因工程的操作工具.pptVIP

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  • 2016-06-22 发布于湖北
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作为载体的必要条件: 1、能自我复制或整合到受体染色体DNA上 随染色体DNA的复制而同步复制; 2、有一或多个限制酶的切割位点; 3、必须带有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择 4、对受体细胞无毒害 5、大小应合适,便于提取和体外操作。 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵,但是,生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制,以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具,当外源DNA侵入时,会利用限制酶将外源DNA切割掉,以保证自身的安全。所以,限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效,从而达到保护自身的目的。 含有某种限制酶的细胞,其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。     * 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” DNA连接酶——“分子缝合针” 运载体——“分子运输车” 分子手术刀——限制性核酸内切酶(限制酶) 1.来源: 原核生物 2.作用: 3.特点:特异性 (1)、识别特定核苷酸序列; (2)、切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 4.结果: 产生黏性末端 或平末端 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列并在特定的切点上切割DNA分子。 下列黏性末端属于同种内切酶切割而成的是 A、①② B、①③ C、①④

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