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* 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 在TDPCR中，扩增的前两个循环中的复性温度应设计在比富含GC的引物与靶DNA完全形成杂合的溶解温度高（Tm）大约3度，在随后的循环中复性温度在每个循环降低1度。在一些温度点，可以达到特异引导的许可温度，从而目的序列的扩增开始。降落PCR是优化PCR最迅速的方法， 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 当遇到诸如引导效率低，错误引导和形成引物二聚体等问题时，降落PCR和热启动PCR配合应用是首选方法。 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 内含子很少的基因的转录本做模板时，不易鉴别从污染的基因组DNA衍生的扩增产物。 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 与传统PCR技术相比， 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * Fig1. 两个试管内都含有DNA和探针，left:探针和DNA没有互补，所以没有荧光，right:探针和DNA有互补，所以有荧光信号。 Fig2. Exponential growth phase-指数增长期，Plateau phase-平台期 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 标准曲线模板数是从105-109. 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Biochem. Mol. Biol., PUMC 核酸技术（二） * 2012-12-11 H. Chen, Dept. of Bioc
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