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mRNA 是翻译的直接模板 (一) 多顺反子 mRNA 与单顺反子 顺反子 (cistron) 遗传学将编码一条多肽链的遗传单位称为顺反子。 多顺反子 (polycistron) 原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位，转录生成的 mRNA 可编码几种功能相关的多肽链，称为多顺反子。 单顺反子 (monocistron, single cistron) 真核细胞的每一成熟 mRNA 只编码一种多肽链，为单顺反子。 原核生物 mRNA 真核生物 mRNA 非翻译区 核糖体结合位点 起始密码子 终止密码子 1. 自发性突变 (1) DNA 复制的错误 DNA 聚合酶受到某些因素的影响，错误的碱基没有被及时去除。 (2) DNA 修复合成出现的错误 DNA 损伤后，参与 DNA 修复的酶可能发生碱基配对错误，造成 DNA 突变。 (3) 碱基自发改变 碱基上的氨基 (-NH2) 可以互变异构成亚氨基 (=NH)；酮基 (C=O) 也可以互变异构生成烯醇基 (-C-OH)。 引发 DNA 突变的因素 2. 环境因素 (1) 物理因素：紫外线 (UV)、各种辐射 T-T 二聚体 (2) 化学因素：化学诱变剂 5-BU (5-溴尿嘧啶) 的酮式与腺嘌呤配对，烯醇式与鸟嘌呤配对，使 A-T 变为 G-C，相反则可将 G-C 变为 A-T。 DNA 缺失 G G ? mG 烷化剂 (氮芥类) -G- -A- -C- -T- C ? U 亚硝酸盐 -T- -C- -A- -G- T ? C 羟胺类 -A- -G- -T- -C- A ? 5-BU ? G 碱基类似物 (5-BU) DNA分子改变 作用位点 化合物 致癌加合物 DNA 聚合酶 用单分子方法观察致癌加合物对 DNA 聚合酶的影响 致癌加合物与 DNA 共价结合，导致在 DNA 合成时 DNA 聚合酶在加合物附近频繁掺入错误的核苷酸。 DNA 损伤的修复 DNA 修复 (DNA repair) 对发生了突变的 DNA 所进行的补救机制，称为 DNA 修复。 DNA 修复方式： 光复活修复 (photoreactivation repair) 切除修复 (excision repair) 重组修复 (recombinational repair) SOS 修复 (SOS repair) 切除修复 (excision repair) 在一系列酶的作用下，将 DNA 分子中损伤部分切除，并以完整的另一条链为模板，修补切除的部分，使 DNA 恢复正常结构。 碱基切除修复 核苷酸切除修复 碱基切除修复 DNA 糖基化酶 (DNA glycosylase) 识别、切除受损碱基，产生 AP 位点 (apurinic 或 apyrimidinic site)； AP 内切酶在 AP 位点的 5’ 端切断磷酸二酯键； AP 裂解酶再切割 AP 位点的 3’ 端； 产生的单一核苷酸空隙由 DNA 聚合酶及 DNA 连接酶封闭 。 AP 位点 核苷酸切除修复 切除修复为细胞内最有效的修复方式。 人类的核苷酸切除修复： 通过特异的核酸内切酶识别损伤部位； 由酶复合物在损伤的两边切除几个核苷酸； DNA pol ? 另一条完整的 DNA 链为模板进行修复合成; DNA 连接酶连接新合成的 DNA 链与原来 DNA 链之间的缺口。 SOS 修复 (SOS repair) SOS 修复是 DNA 受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种 DNA 修复方式。 SOS 修复的特异性低，对碱基的识别、选择能力差。通过 SOS 修复，复制如能继续，细胞可存活，但 DNA 保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。 E. coli 中各种与修复有关的基因组成一个称为调节子 (regulon) 的网络式调控系统。 RNA 转录 转录 (transcription) 以 DNA 单链为模板，NTP 为原料，在 DNA 依赖的 RNA 聚合酶催化下合成 RNA 链的过程。 模板： DNA (不对称转录) 酶： RNA 聚合酶，不需要引物 原料： NTPs (ATP, UTP, GTP, CTP) 方向: 5’? 3’ 产物： mRNA, tRNA, rRNA, 小 RNA RNA 转录的特点 D