第三章转基因生物 第十三周星期五上午.pptVIP

一般说来，从细菌到哺乳动物的全部生命有机体，它们的基因都是由DNA构成的。由于所有生物的DNA的基本结构是一致的，因此，来自两种生命形态的基因可以融为一体。 由此可见，基因的DNA共性，是进行基因工程的重要理论基础之一。 DNA分子是遗传物质和基因的载体。基因是细胞中所有的RNA及蛋白质分子的“蓝图”。 一旦基因发生突变，那么由它指导合成的蛋白质也将随之发生变化，甚至可能导致活性的丧失。 （二）重组载体的构建 选择合适的基因载体，要求载体序列不干扰外源 基因的表达、能接受外源DNA、稳定、对宿主细胞无 威胁。 （三）重组载体的体外验证（in vitro） 重组载体的正确性验证，如拷贝数、连接方向等。 对于连有组织特异性启动子或局部体细胞转染的载体 需先在同类型的体外离体培养细胞中初步验证表达特 性。 （四）基因转移 1）化学法 2）物理法 3）生物法 （五）转基因动物模型的验证 从基因组、mRNA、蛋白质和整体表型各个层次进行 验证。用核酸杂交、聚合酶链反应、免疫印迹杂交、 酶联免疫法、免疫荧光法和Western杂交法等多种方 法，筛选出有外源基因整合的阳性动物，传代后检测 外源基因在转基因动物中的表达情况，对外源基因表 达产物的生物活性和生化性质进行鉴定，以及检查转 基因动物的生理功能和是否出现某些疾病症状的表型 等。 1）显