酸性氧化电位水杀菌效果和毒性试验观察.docVIP

酸性氧化电位水杀菌效果和毒性试验观察 观察一种酸性氧化电位水对细菌繁殖体及白色念珠菌的杀灭效果，观察该消毒剂的动物毒性。方法 采用悬液定量法杀菌试验和动物毒性试验进行研究。结果 该酸性氧化电位水（有效氯192mg/L，氧化还原电位1188mv，pH值为2.02）原液作用20s，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的杀灭对数值均可达到5.0以上，对白色念珠菌的杀灭对数值可达到4.0以上。该酸性氧化电位水原液对家兔皮肤刺激反应积分值均为0，对雌、雄小白鼠经口LD50均大于5000 mg/kg（体重），对家兔急性眼刺激反应评分均为0，对阴道粘膜刺激指数为0.45。结论 该酸性氧化电位水对细菌繁殖体及白色念珠菌有良好的杀灭效果，属实际无毒类物质，对动物皮肤、眼和阴道黏膜无刺激性。 酸性氧化电位水（Electrolyzed oxidizing water，EOW）又称强酸性水、酸化水、氧化电位水、机能水等，具有高氧化还原电位(Oxidizing reductant potential，ORP)、低pH、含低浓度有效氯[1]。EOW有杀菌广谱、作用迅速、无刺激、不残留毒性等优点，所以一经问世就受到广泛关注。试验的EOW有效氯192mg/L，ORP 1188mv，pH值为2.02，观察其对细菌繁殖体及真菌的杀灭效果，并观察动物毒性，现将结果报告如下。 1. 材料与方法 1.1试验材料 细菌悬液：将试验菌（金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）3~14代（白色念珠菌为5~6代）24 h斜面培养物用PBS洗下，制成菌悬液备用。所用试验菌均由国家菌种保藏中心提供。 试验用EOW由西安唯美生物技术有限公司生产，灌装且装满密封于棕色玻璃瓶中。 1.2试验方法 1.2.1中和剂鉴定试验 分别以金黄色葡萄球菌和白色念珠菌为代表，设计6组试验，按悬液定量法进行。各组试验和结果判定标准均按照卫生部2002年版《消毒技术规范》[2]执行。试验重复3次。 1.2.2细菌定量杀灭试验 将EOW原液（阳性对照为PBS）和试验用菌悬液置于20℃恒温水浴箱。在无菌试管内加入1.0ml菌悬液，再加入4mlEOW，立即混匀。作用至预定时间，取0.5ml样液加入到装有4.5ml中和剂试管内混匀。中和作用10min，经充分震荡后取样液做活菌培养计数，计算杀灭对数值。试验重复3次。 1.3毒性试验 试验方法和评价标准均以卫生部2002年版《消毒技术规范》[2]为准。 1.3.1皮肤刺激试验 先用脱毛剂将日本大耳白兔（由西安交通大学医学院实验动物中心提供，3只雄性，体重2.0~2.2kg）背部脊柱两侧的毛去掉。再将EOW原液直接涂在去毛完整皮肤上，用纱布敷贴，然后用无刺激塑料膜覆盖，胶布固定。另一侧去毛皮肤作为空白对照。敷贴时间为4h。试验结束后，用温水除去残留受试物。分别于去除受试物后1h、24h和48h观察皮肤局部反应，并进行刺激反应评分。 1.3.2急性经口毒性试验 取禁食16h的试验昆明种小白鼠（由第四军医大学实验动物中心提供。雌雄各10只，体重18~22g）20只，雌、雄各半，将EOW按5000mg/kg（体重）的剂量，1次灌胃给予，连续观察14d，记录中毒表现及死亡情况。 作者单位：陕西省疾病预防控制中心（陕西 西安 710054） 作者简介：董小峰（1974-.---），男，硕士，主管医师，主要从事消毒剂、消毒器械实验室鉴定及医院院内感染控制工作。 1.3.3眼刺激试验 吸取EOW原液0.1ml，滴入新西兰大白兔（由第四军医大学实验动物中心提供。3只雄性，体重2.2~2.5kg）一侧眼结膜囊内。另一侧眼以生理盐水作为正常对照。滴EOW后，将兔眼闭合，然后用生理盐水冲洗。于滴眼后1h、24h、48h、72h、7d、14d和21d肉眼观察家兔眼结膜、虹膜和角膜的损伤与恢复情况。在72h内未出现刺激反应，或第7d或第14d，眼睛刺激反应完全恢复，即终止试验。对家兔眼角膜、虹膜和结膜的急性刺激反应进行评分。分别以动物眼角膜、虹膜和结膜充血、水肿的平均评分和恢复时间进行，按眼刺激反应分级标准判定受试物对眼睛的刺激强度。 1.3.4阴道粘膜刺激试验 将新西兰大白兔（由第四军医大学实验动物中心提供，6只雌性，体重2.0~2.5kg）仰面固定，暴露出会阴和阴道口。将导管用受试液湿润后轻柔地插入阴道（4~5cm），并用注射器缓慢注入2mlEOW，抽出导管，完成染毒。对照组大白兔用生理盐水作同样处理。染毒后24h，处死动物，肉眼观察阴道是否有充血、水肿等表现，供病理取材时参考。选取阴道的两端和中央3个部位的组织制片，HE染色后进行组织病理学检查。对阴道粘膜的刺激反应进行评分。将试验组平均积分减去对照组平均积分得出刺激指数后，进行刺激强度分级。 2.结