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姓 名:郑晓雪指导老师:徐静班 级:08化学工程与工艺学 号077 二、实验方法 大青叶提取步骤 1、总黄酮检测方法 2、总酚检测方法 3、清除 DPPH·自由基能力测定方法 4、清除 ABTS·+自由基能力的测定 三、实验结果分析 2、超声时间的确定 3、超声温度的确定 4、料液比的确定 5、四个指标之间的相关性分析(Excel) 四、结果讨论 * * LOGO * LOGO * LOGO * * LOGO * 超声法提取大青叶中总黄酮的 工艺及其抗氧化活性研究 研究背景 实验方法 实验结果分析 结果讨论 致谢 目 录 大青作为一种药用植物,叶的成分具有防治流行性脑脊髓膜炎、流行性乙型脑炎、传染性肝炎、清热解毒、消炎镇痛 、抗炎杀菌、祛风除湿等药用功能,研究前景非常广阔。 黄酮具有抑菌抗病毒、镇痛、止咳、抗炎、抗衰老、抗肿瘤、肝脏保护作用、调节免疫系统、抗氧化等功能,使黄铜类化合物成为植物化学及医药保健领域研究的热点之一。 利用有机溶剂超声波法对大青叶进行提取,通过对比测定其总黄酮得率、总酚得率、清除DPPH·和ABTS·+自由基的清除率,优化提取工艺,为推广其医药工业化发展提供科学理论依据 大青研究 现状 黄酮药 理活性 目的 一、研究背景 大青叶,阴干,粉碎,准确称取一定质量 加乙醇,超声波作用(乙醇浓度、超声时间、 超声温度、料液比),抽滤 标准曲线的绘制 将滤渣重复提取过程一次 合并滤液旋蒸,定容至100mL,取样品测试 结果分析,工艺条件的优化 取稀释5倍后样品溶液1mL 0.3mL5%NaNO2,0.3mL10%Al(NO3)3, 4mL1mol/LNaOH 置于10mL 比色管,用60%乙醇溶液稀释至刻度,放置15min后 紫外分光光度计 分别在510nm处测定其吸光度, 代入标准曲线回归方程可得浓度数据 经换算后得样品中总黄酮含量 取稀释5倍后样品溶液1mL 2 ml福林试剂、0.75mL7.5%碳酸钠溶液 置于10mL 比色管,用蒸馏水稀释至刻度,放置2h后 紫外分光光度计 分别在765nm处测定其吸光度, 代入标准曲线回归方程可得浓度数据 经换算后得样品中总酚含量 DPPH法测定机理 取黄酮提取液用60%乙醇稀释至2.5倍 取稀释液0.1mL至于10mL试管中 再加入配置好DPPH· 溶液3.9mL 反应30min,在517nm处测定其吸光度 测定标准品Vc的吸光度 带入方程,得样品清除率 ABTS法是以ABTS与过硫酸钾反应生成稳定的蓝绿色阳离子自由基 ABTS·+ ,向其中加入被测物质,如果该物质中存在抗氧化成分,则该物质会与 ABTS·+ 发生反应而使反应体系褪色,溶液颜色变浅,变浅程度与抗氧化剂的清除自由基能力成正比例.然后在 ABTS·+ 这种自由基的最大吸光波长下(一般选择734nm) 检测吸光度的变化来反映物质的抗氧化能力。 ABTS法测定机理 取黄酮提取液用60%乙醇稀释至2.5倍 取稀释液0.1mL至于10mL试管中 再加入配置好的ABTS·+溶液3.9mL 反应30min,在734nm处测定其吸光度 测定标准品Vc的吸光度 带入方程,得样品清除率 1、乙醇浓度确定 总黄酮得率 总酚得率 清除DPPH·自由基的清除率 清除ABTS·+自由基的清除率 总酚得率 DPPH·的 清除率 ABTS·+的 清除率 总黄酮 得率 确定最佳乙醇浓度为40% 总黄酮得率为5.06% 总酚得率4.28% DPPH·的清除率83.47%,说明抗氧化 活性很高 ABTS·+自由基的清除率86.28%,说明 抗氧化活性很高 总黄酮得率 总酚得率 清除DPPH·自由基的清除率 清除ABTS·+自由基的清除率 总酚得率 DPPH·的 清除率 ABTS·+的 清除率 总黄酮 得率 确定最佳超声时间为80min 总黄酮得率为5.15% 总酚得率为5.05% DPPH·的清除率为81.97%,说明抗氧 化活性很高 ABTS·+自由基的清除率为87.13% ,说明抗氧化活性很高 总黄酮得率 总酚得率 清除DPPH·自由基的清除率 清除ABTS·+自由基的清除率 总酚得率 DPPH·的 清除率 ABTS·+的 清除率 总黄酮 得率 确定最佳超声温度为80℃ 总黄酮得率为4.78% 总酚得率为5.27% DPPH·的清除率为79.18%,说明抗氧化活性很高 ABTS·+自由基的清除率为95.99%,说明抗氧化活性 总黄酮得率 总酚得率
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