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珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory 赛乐迪亚（Serodia）TPPA 梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory 明胶颗粒的制备 明 胶 阿拉伯胶 醋 酸 染料/色素 偏 磷 酸 乙 醇 水 Φ 3.0μm 表面电荷 -0.760 ~ -0.830 明胶颗粒（电镜照片） 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory 明胶颗粒的致敏 5%明胶颗粒/0.15M PBS（pH7.2） 5ppm 丹宁酸/0.15M PBS（pH7.2） 孵育（37℃，15min） 生理盐水洗涤（2000rpm，5min） 活化的明胶颗粒/0.15M PBS（pH5～9） 抗原 孵育（37℃，60min） 生理盐水洗涤（2000rpm，5min） 5%致敏明胶颗粒/悬浮液* 冷冻干燥 * 0.15M PBS（加入正常兔血清、明胶、阿拉伯胶等） 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory Serodia TPPA的操作步骤 6、结果判读 1、加入样品稀释液 100μl 25μl 25μl 25μl 孔号 1 4 3 2 1 2、加入测试样品 25μl 孔号 1 4 3 2 1 致敏颗粒 4、加入明胶颗粒 最终稀释倍数 孔号 1 4 3 2 1 1:40 1:80 25μl 25μl 未致敏颗粒 5、混匀，加盖，孵育2个小时 3、样品的倍比稀释 孔号 1 4 3 2 1 最终稀释倍数 1:20 1:40 25μl 25μl 25μl 25μl 弃去 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory 明胶凝集试验(PA)与ELISA操作步骤的比较 ELISA PA 加入样品和稀释液 第一步反应 洗涤 洗涤 第二步：酶反应 显色 第三步： 加入底物 结果判读 孵 育 凝集图像 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory Serodia TPPA的结果判读（定性试验） 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory Serodia TPPA的结果判读（定量试验） 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory 反应温度的影响 抗体效价 5 12 15 25 30 37 1：2560 1：1280 1:640 1：160 1:80 1:80 样品3 样品2 样品1 样品11 1:320 【℃】 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory 反应时间的影响 可判定的凝集图像 0 1 2 4 7 24 【小时】 抗体效价 1：2560 1：1280 1:640 1：160 1:80 1:80 样品1 样品2 样品3 样品11 1:320 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory 抗凝剂的影响 样品 血清 血浆 柠檬酸 EDTA 肝素 1 1：160 1：160 1：160 1：160 2 1：5120 1：2560 1：5120 1：5120 3 1：1280 1：1280 1：1280 1：1280 4 1：640 1：320 1：640 1：640 5 1：5120 1：10240 1：10240 1：10240 6 1：320 1：320 1：320 1：320 7 1：40960 1：20480 1：20480 1：20480 8 1：2560 1：1280 1：1280 1：2560 9 1：640 1：640 1：640 1：640 10 1：2560 1：1280 1：2560 1：2560 11 1：640 1：640 1：640 1：640 珠海丽珠试剂有限公司 Livzon (Group) Reagent Factory 血清灭活的影响 样品 灭活前 灭活后 1 1：320 1：320 2 1：5120 1：5120 3 1：1280 1：1280 4 1：640 1：640 5 1：512