第8章基因表达调控教材.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 五、原核生物在翻译水平的多个环节受到精细调控 （一）转录与翻译的偶联调节提高了基因表达调控的有效性 （二）蛋白质分子结合于启动子或启动子周围进行自我调节 （三）翻译阻遏利用蛋白质与自身mRNA的结合实现对翻译起 始的调控 （四）反义RNA结合mRNA翻译起始部位互补序列以调节翻 译起始 （五）mRNA密码子的编码频率影响翻译速度 第 三 节  真核基因表达调控 一、真核细胞基因表达特点 真核基因组比原核基因组大得多 哺乳类动物基因组DNA 约 3×109碱基对。 人编码基因约4万个，编码序列仅占总长的1%。 rDNA等重复基因约占5%~10%。 真核结构基因两侧存在有不被转录的非编码序列，往往是基因表达的调控区。在编码基因内部尚有内含子（intron）、外显子（exon）之分，因此真核基因是不连续的。 ③ 真核基因中存在非编码序列和间隔区，故： 具有不连续性 ② 真核基因组含有大量的非编码序列 ④ 真核基因转录产物为单顺反子 单顺反子(monocistron) 即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。 二、染色质结构与真核基因表达密切相关 （一）转录活化的染色质对核酸酶极为敏感 活化基因常有超敏位点，位于调节蛋白结合位点附近。 （二）转录活化染色质的组蛋白发生改变 组蛋白变化 富含Lys组蛋白水平降低 H2A·H2B二聚体不稳定性增加 组蛋白H3、H4发生乙酰化、甲基化或磷酸化修饰 组蛋白修饰对于基因表达影响的机制也包括两种相互包容的理论。即：组蛋白的修饰直接影响染色质或核小体的结构，以及化学修饰征集了其他调控基因转录的蛋白质，为其他功能分子与组蛋白结合搭建了一个平台。这些理论构成了“组蛋白密码”的假说。 组蛋白 氨基酸残基位点 修饰类型 功 能 H3 Lys-4 甲基化 激活 H3 Lys-9 甲基化 染色质浓缩 H3 Lys-9 甲基化 DNA甲基化所必需 H3 Lys-9 乙酰化 激活 H3 Ser-10 磷酸化 激活 H3 Lys-14 乙酰化 防止Lys-9的甲基化 H3 Lys-79 甲基化 端粒沉默 H4 Arg-3 甲基化 H4 Lys-5 乙酰化 装配 H4 Lys-12 乙酰化 装配 H4 Lys-16 乙酰化 核小体装配 H4 Lys-16 乙酰化 Fly X激活 组蛋白修饰对染色质结构与功能的影响 （三）CpG甲基化水平降低 CpG岛：基因的5’末端调控区存在一段富 含成对的胞嘧啶、鸟嘧啶（CpG）的序列 去甲基化的CpG岛对转录起始是必需的 （一）真核生物启动子结构和调节远较原核生物复杂 启动子 真核基因启动子是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件。 TATA盒 GC盒 CAAT盒 三、基因组中的顺式作用元件是转录起始的关键调控部位 CCAAT盒 GC盒 TATA盒 转录起始点 高等真核生物 上游激活序 列（UAS） TATA盒 转录起始点 酵母 真核基因启动子的典型结构 指远离转录起始点、决定基因的时间、空间特异性、增强启动子转录活性的DNA序列。其发挥作用的方式通常与方向、距离无关。 某些基因的负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 （二）增强子是一种能够提高转录效率的顺式调控元件 （三）沉默子能够抑制基因的转录 四、转录因子是转录调控的关键分子 （一）通用转录因子 是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA(mRNA、tRNA及rRNA)转录的类别。 （二）特异转录因子 为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。 转录激活因子 转录抑制因子 （三）转录因子作用的结构特点 DNA结合域 转录激活域 TF 蛋白质-蛋白质结合域 （二聚化结构域） 谷氨酰胺富含域 酸性激活域 脯氨酸富含域 1.转录因子的DNA结合结构域主要有以下几种 锌指(zinc finger) C —— Cys H —— His 常结合GC盒 碱性螺旋-环-螺旋 常结合CAAT盒 3. 碱性亮氨酸拉链 （四）二聚体是常见的蛋白质-蛋白质相互作用方式 2. 转录因子的转录激活结构域 （1）酸性激活结构域 （2）谷氨酰胺富含结构域 （3）脯氨酸富含结构域 真核RNA聚合酶Ⅱ在转录因子帮助下，形成转录起始复合物。 PolⅡ TFⅡH TAF TFⅡF TAF TAF TFⅡA TFⅡB TBP DNA TATA EBP