实验二 显微镜油镜的使用、细菌形态观察及大小测定.pptVIP

实验二 油镜的使用、细菌形态的观察及微生物大小测定 1 目的要求 1.1 学习并掌握油镜的原理和使用方法 1.2 学习观察细菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、炭疽杆菌、葡萄球菌、链球菌、霍乱弧菌)的形态特征。 1.3 掌握微生物大小的测定方法。 2 实验原理 2.1 油镜的工作原理 2.1.1增加照明亮度 2.1.2 增加显微镜的分辩率 2.2 微生物大小测定原理 3 实验器材 显微镜、擦镜纸、细菌教学片、目镜测微尺、镜台测微尺 4、操作步骤 4.1 细菌的形态观察 4.1.1 观察前的准备 （1）显微镜的安置 （2）光源的调节 （3）调节双筒显微镜的目镜 （4）聚光器数值孔径值的调节 4.1.2 显微观察 （1）低倍镜观察 （2）高倍镜观察 （3）油镜观察 4.2 微生物大小的测定 4.2.1 装目镜测微尺 把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，旋上目镜透镜。 4.2.2 目镜测微尺的校正? 把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。因为镜台测微尺的刻度每格长l0μm，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。 例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺5小格重叠，已知镜台测微尺每小格为l0μm，则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/5＝10μm 用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。 4.2.3 细胞大小的测定 ??? 移去镜台测微尺，换上细菌教学片，先在低倍镜下找到目的物，然后在油镜下用目镜测微尺来测量细菌菌体的长，宽各占几格（不足一格的部分估计到小数点后一位数）。测出的格数乘上目镜测微尺每格的校正值，即等于该菌的长和宽。一般测量菌体的大小要在同一个标本片上测定10—20个菌体，求出平均值，才能代表该菌的大小。而且一般是用对数生长期的菌体进行测定。 注意事项：观察时光线不宜过强,否则难以找到镜台测微尺的刻度;换高倍镜和油镜校正时,务必十分小心,防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头。 1.测微尺的校正（标定）： 两重合线间镜台测微尺格数Ⅹ10 目镜测微尺每格长度(μm)= 两重合线间目镜测微尺格数 2．细菌菌大小的测定： 取细菌装片，用高倍镜测出宽和长各占目镜测微尺的格数，再将测到的格数乘以目镜测微尺（用高倍镜时标定的）每格所代表的长度，即为细菌的实际大小。 大肠杆菌：大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli） 革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周身鞭毛，能运动，无芽孢。 大肠杆菌（E. coli）为埃希氏菌属(Escherichia)代表菌。一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。 破伤风梭菌 枯草芽孢杆菌 芽孢 枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞 0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。 炭疽杆菌菌体粗大，两端平截或凹陷，是致病菌中最大的细菌。排列似竹节状，无鞭毛，无动力，革兰氏染色阳性，本菌在氧气充足，温度适宜（25～30℃）的条件下易形成芽胞。 在活体或未经解剖的尸体内，则不能形成芽胞。芽胞呈椭圆形，位于菌体中央，其宽度小于菌体的宽度。在人和动物体内能形成荚膜，在含血清和碳酸氢钠的培养基中，孵育于CO2环境下，也能形成荚膜。形成荚膜是毒性特征。 炭疽杆菌（普通平板） 葡萄球菌（Staphylococcus）是一群革兰氏阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状，故名。多数为非致病菌，少数可导致疾病。葡萄球菌是最常见的化脓性球菌，是医院交叉感染的重要来源，菌体直径约0.8μm，小球形，但在液体培养基的幼期培养中，常常分散，细菌细胞单独存在。 金黄色葡萄球菌 链球菌(Streptococcus)是化脓性球菌的另一类常见的细菌，广泛存在于自然界和人及动物粪便和健康人鼻咽部，引起各种化脓性炎症，猩红热，丹毒，新生儿败