内膜系统与蛋白质分选.ppt

9.4.2 溶酶体的发现与溶酶体的酶类 溶酶体及其酶类 9.4.3 溶酶体的类型 1.初级溶酶体(primary lysosome) 2.次级溶酶体(secondary lysosome) (1)自噬性溶酶体(aotolysosome) (2)异噬性溶酶体(heterolysosome) 3.后溶酶体(post lysosome) 9.4.4 溶酶体的功能 吞噬作用(Phagocytosis) 自噬作用(Autophagy) 自溶作用(Autolysis) 其它的生理功能 胚胎发育和形态建成 受精作用(fertilization) 9.4.5 溶酶体的生物发生 9.4.5.1 溶酶体酶的M6P标记 9.4.5.2 溶酶体的甘露糖6-磷酸分选途径 9.4.5.4 (胞)内体(endosome) 初级内体(early endosome): 由于细胞的内吞作用而形成的含有内吞物资的膜结合细胞器. 次级内体(late endosome):初级内体经过发育,其结合物上的受体脱离,pH值比初级内体小的成熟内体. 9.5 细胞的分泌与内吞作用 ◇脂的合成与转运 合成甘油三脂(triacylglycerol) 磷脂合成 在光面内质网上合成的磷脂先作为内质网膜的构成成分,然后再转运到其他的膜上. 磷脂转运 ◇解毒作用(detoxification) 光面内质网含有丰富的氧化酶系统(如细胞色素P450、NADH细胞色素C还原酶等)能使许多有害物质由脂溶性转变成水溶性而被排出体外.此反应主要在肝细胞的sER中进行. ◇Ca2+的调节作用 肌质网是细胞内特化的光面内质网,有高浓度的钙结合蛋白,每个钙结合蛋白可以结合30个左右的Ca2+. 9.2.3 糙面内质网的功能—蛋白质合成与转运 ◇信号序列的发现和证实 Redman和Sabatini用分离的RER小泡研究膜结合核糖体合成的蛋白质去向. 1971年美国洛克菲勒大学的Blobel等提出了信号序列(signal sequence)的概念。 信号序列的间接证据 1972年, Milstein 和他的同事发现: a.从细胞质分离的IgG轻链:多20个氨基酸残基 b.释放到细胞外的IgG轻链:少20个氨基酸残基 信号肽的证实 加与不加rER小泡,产物不同 蛋白水解酶水解实验 多聚核糖体的离体翻译 蛋白水解酶水解实验 多聚核糖体实验 ◇信号序列的一般特征及早期信号假说 一般特征 长度: 15～35 氨基酸残基; 结构: N端含1或多个带正电荷氨基酸,其后是6～12个连续的疏水残基; 功能: 在蛋白质合成中将核糖体引导到内质网,进入内质网后通常被切除. 1975年，Blobel等正式提出了信号假说 合成始于游离核糖体; N端信号序列靠自由碰撞与内质网膜接触,然后插入内质网的膜; 蛋白质以袢环形式穿过内质网的膜; 蛋白的存在方式: a.若信号序列被信号肽酶切除:完全进入腔 b.若是停止转移信号: 膜蛋白? Blobel received the Nobel Prize for medicine in 1999 ◇信号假说的补充 Signal recognition particle, SRP 停靠蛋白(docking protein, DP) a. 是SRP在内质网膜上的受体蛋白; b. 两个亚基:亲水的α亚基, 疏水的β亚基. 易位子( translocon) a. Multiple copies of the Sec61 complex assemble to form a cylinder translocon channel b. 5～6 nm high and 8.5 nm in diameter, with a central pore, roughly 2 nm in diameter c. 哺乳动物细胞中有三种类型的Sec61, 即α、β 和γ d. Sec61α有10个跨膜α螺旋 易位子 ◇蛋白质共翻译转运的机制—信号假说 ◇膜蛋白的共翻译转运机理 Start-transfer signal 在跨膜时保持正电荷一端朝向胞质溶胶面 内部信号序列与单次跨膜蛋白 终止转移肽与单次跨膜蛋白 二次跨膜蛋白与多次跨膜蛋白 ◇Bip蛋白在ER蛋白质的转运和装配中的作用 ◇蛋白质在内质网中的修饰 N-糖基化(protein glycosylation) 指在rER上合成的蛋白与寡糖基共价连接 羟基化 除了N-糖基化以外,新生肽的脯氨酸和赖氨酸要进行羟基化,形成羟脯氨酸和羟赖氨酸.这种反应只发生在少数蛋白质身上. Protein glycosylation in the rough ER 形成脂锚定蛋白