梅毒实验室诊断(刘利洪).ppt

梅毒实验室诊断 德阳市人民医院检验科 刘利洪 “性病”概念的演化 性病：是指通过性接触而发生传播的一组传染病。 20世纪70年代以前——经典性病（venereal diseases,VD） 包括：梅毒、淋病、软下疳等 1975年，WHO——性传播疾病（sexually transmitted diseases,STD） 20世纪90年代以后——性传播感染（sexually transmitted infections,STI），包括：艾滋病、梅毒、淋病、CA、GH等。 历史的回顾 性病是一个历史悠久的疾病，多数认为梅毒是1505年由印度传入我国广东岭南。 梅毒是一个曾经广泛流行的性病，解放初期，估计的性病（主要是梅毒）患者约为1000万。 1954年之后，全国逐渐形成了一个“四级”皮肤性病防治体系。 1964年，实现了全国梅毒基本消灭的目标。 性病死灰复燃 上世纪70年代末，改革开放后， ——性观念的改变 ——性产业的出现 ——性生活方式的变化 高危人群规模在不断的增加，如：暗娼、男男性接触者、流动人口等。 ——性病在我国死灰复燃，再度流行。 现况 严重的公共卫生问题和社会问题； 临床认知水平不够，实验室诊断水平参差不齐； 实验室检测各流程存在不规范现象； 新的实验室诊断技术不断出现而又缺乏了解； 部分（如私人诊所）医疗工作存在过度诊疗或诊疗不规范，延误患者的最佳诊疗时机； 无症状感染者成为维系性病流行的重要的传染源。 如何就目前高发的性病，尤其是对梅毒进行有效监测和控制？ 如何对高危人群及潜在易感人群进行筛查，主动发现无症状的性病感染者？ 如何确定感染的病原体种类？ ——需要完善的实验室检测工作，包括检测能力建设和质量控制 性病防治工作的重点 两个系统 疫情监测系统 实验室检测系统-实验室检测能力和质量控制 一个服务 规范化医疗服务 梅毒的定义 梅毒是由密螺旋体之一的梅毒螺旋体引起的一种慢性全身感染性疾病。是传统的性传播疾病之一。 常用梅毒实验室检测方法 病原学检测 血清学检测 病原学检查的原理 螺旋体进入人体后，在皮下黏膜增殖并沿淋巴管至附近的淋巴结经过2~4周的潜伏在感染部位形成硬下疳。数天至1周后淋巴结肿大。再以后经血液传播至全身，或孕妇的羊水中都有大量螺旋体的存在。因此，在梅毒病人的硬下疳、扁平湿疣等皮损以及梅毒病人肿大的淋巴结，梅毒孕妇的羊水，都可以采集标本来做此检查 梅毒病原学检查的应用范围及标本采集 适用范围 病人出现的硬下疳、扁平湿疣、肿大的腹股沟淋巴结穿刺液、羊水穿刺液等。 标本采集：略 梅毒病原学检查的方法 1、暗视野显微镜检查法 2、镀银染色检测法 3、刚果红负染色法 暗视野检查法 仪器器材 1、暗视野显微镜 2、无菌纱布 3、不锈钢刮刀 4、灭菌棉拭子 5、灭菌生理盐水 6、载玻片、盖玻片 暗视野检查法 标本收集 1、皮肤黏膜组织液 2、淋巴液 3、羊水 暗视野检查法 检测流程 1、制片 2、暗视野显微镜的使用及观察 暗视野检查法 结果判读 发现有纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，具有旋转、蛇行及伸缩等特征性的运动方式，可判断为梅毒螺旋体 报告 暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体报告“发现苍白螺旋体” 暗视野检查法 临床意义 1、检测阳性，在临床上可确证梅毒； 2、如未能发现梅毒螺旋体，不能排除诊断； 3、无论暗视野显微镜检查的结果如何，都应进一步进行血清学检测。 镀银染色检查 检测原理 梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染成棕黑色，可以从普通高倍显微镜下观察到梅毒螺旋体。 镀银染色检查 仪器器材 1、普通显微镜 2、加拿大树胶 3、罗吉固定液 4、鞣酸媒染剂 5、Fontana银溶液 6、无水乙醇 7、无菌纱布等取材用品 镀银染色检查 操作流程 1、涂片干燥：自然干燥，不可用火固定； 2、固定：2-3分钟 3、洗涤：无水乙醇 4、媒染：微加热、30秒 5、银染：水洗、微加热、30秒 6、镜检：水洗待干、封片镜检 镀银染色检查 结果判读 在显微镜下观察到染成棕褐色的螺旋体状生物，可判断为梅毒螺旋体。 报告 见到染成棕褐色梅毒螺旋体报告阳性结果，否则报告阴性结果。 刚果红负染色法 原理： 刚果红是一种酸碱指示剂在涂有标本的玻片上刚果红将玻片染色，而螺旋体、细菌、细胞、真菌等生物体形成占位而不着色。再用盐酸蒸气将刚果红的红色熏成蓝色方便观察。 刚果红负染色法 器材及试剂： 1、普通显微镜 2、1%的刚果红水溶液、 3、浓盐酸。 刚果红负染色法 结果判读： 在蓝黑色背景中发现白色纤细的螺旋状微生物螺距数量