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二、植物体细胞杂交技术 2. 概念 二、植物体细胞杂交技术 2. 概念 将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 3. 成果和未解决的问题 二、植物体细胞杂交技术 3. 成果和未解决的问题 成果: 克服不同生物远缘杂交的障碍,出现自然界没有的新品种。 二、植物体细胞杂交技术 3. 成果和未解决的问题 成果: 克服不同生物远缘杂交的障碍,出现自然界没有的新品种。 未解决的问题: 未能让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状。 二、植物体细胞杂交技术 植物细胞工程 小 结 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 小 结 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 植物细胞的全能性 小 结 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物细胞的全能性 小 结 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 小 结 例1: 某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找污染原因设计了4个实验,实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果,据图可得出的初步结论是什么? 污染主要不是培养基灭菌时间短造成的; 污染主要来源于组织培养所用的离体组织; 调节培养基pH不能解决污染问题; 调节培养温度不能解决污染问题。 例2: 资料一:植物组织培养培养基基本成分: 无机营养成分:C、H、O等大量元素及部分微量元素。有机营养成分:含N物质包括维生素和氨基酸;碳源:2%—5%的蔗糖。琼脂起支持作用。相关激素:生长素,细胞分裂素和赤霉素等。PH值调整如5.0-6.0。 资料二: 在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。使用顺序影响实验结果:先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化;先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂也分化;同时使用分化频率提高。激素用量的比例影响实验结果:生长素用量比细胞分裂素用量比值高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成;比值适中时,促进愈伤组织的生长。 思考:利用以上资料概括脱分化和再分化需要考虑什么外界条件? 思考:利用以上资料概括脱分化和再分化需要考虑什么外界条件? 愈伤组织的形成需要有外界刺激因素和激素诱导,需要加入适当营养物质和植物生长调节剂,如无机盐、糖类、植物激素等。并用适当比例的营养物质和生长调节剂诱导愈伤组织形成和分化。 培养过程中,在培养基上需加入蔗糖,培养时需要光照,那么,培养的植物到底是自养型还是异养型?光的作用是什么?对于上述疑问,某研究性学习小组进行了下列实验:一组在培养基中加30%的蔗糖,另一组不加蔗糖,接种后,每组再分成两个小组,分别在光下和暗中培养。1个月后,观察植物体生长、分化情况,结果为下表: 例3: 不生长,死亡 只生长,不分化 暗 不生长,死亡 正常生长,分化 光 不加蔗糖 加蔗糖 培养条件 你能得出什么结论? 湖南长郡卫星远程学校 2011年下学期 制作 03 湖南长郡卫星远程学校 2011年下学期 制作 03 (第二课时) 植物细胞工程的基本技术 这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么? 不能。因为不同种生物之间存在着生殖隔离,所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。 这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么? 要想让两个来自不同植物的体细胞融合在一起,遇到的第一个障碍是什么? 要想让两个来自不同植物的体细胞融合在一起,遇到的第一个障碍是什么? 细胞壁的阻碍 有没有一种温和的去除细胞壁的方法? 有没有一种温和的去除细胞壁的方法? 有,用酶 纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 过程2 诱导原生质体融合 过程2 诱导原生质体融合 ?是关键环节 过程2 诱导原生质体融合 ?是关键环节 ?根据的原理是:细胞膜的流动性 过程2 诱导原生质体融合 ?是关键环节 ?根据的原理是:细胞膜的流动性 ?方法: 物理方法:离心、振动、电激 化学方法:聚乙二醇(PEG)作诱导剂 过程2 诱导原生质体融合 ?是关键环节 ?根据的原理是:细胞膜的流动性 ?方法: 物理方法:离心、振动、电激 化学方法:聚乙二醇(PEG)作诱导剂 ?成功标志是:杂种细胞产生了新的细胞壁 有没有一种温和的去除细胞壁的方法? 如果两个来源不同的原生质体发生融合形成了杂种细胞,下一步该对此细胞做何种处理? 有,用酶 纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 有没有一种温和的去除细胞壁的方法? 如果两个来源不同的原生质体发生融合形成了杂种细胞,下一步该对此细胞做何种处理? 有,用酶 纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 通过植物组织
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