天然药物化学成分提取分离与鉴定ppt.pptVIP

第一节 有效成分的提取与分离 一、有效成分的提取 （一）溶剂提取法 （二）水蒸气蒸馏法 适用范围：水蒸气蒸馏是分离和纯化与水不相混溶的挥发性有机物常用的方法。 （三）升华法 适用于有升华性质的成分。 二、有效成分的分离和精致 （一）系统溶剂分离法 （二）两相溶剂萃取法 原理： （三）沉淀法 （四）吸附法 （五）盐析法 （六）透析法 1.硅胶 一种酸性吸附剂，使用于分离中性和酸性成分 （1）用法 （2）型号 2.氧化铝 由氢氧化铝灼烧而得，分为碱性、中性和酸性三种 （1）用法 （2）型号 3.活性炭 非极性吸附剂 作用 分离氨基酸、糖类和苷类等水溶性成分 极性顺序： 石油醚 环己烷 二硫化碳 四氯化碳 三氯乙烷 苯 甲苯 二氯甲烷 乙醚 氯仿 乙酸乙酯 正丁醇 丙酮 乙醇 甲醇 吡啶 酸 水 混合溶剂 1.极性吸附剂 被分离得化合物极性基团极性越大、数量越多吸附力越强，共轭双键越多吸附力越强。 2.非极性吸附剂 极性越小吸附力越强。 （一）基本原理 （二）支持剂 （三）分配色谱种类 正相分配色谱 反相分配色谱 （四）操作方式 1.纸色谱 2.分配薄层色谱 3.分配柱色谱 （一）聚酰胺结构 （二）基本理论－氢键 吸附强度的影响因素 1.溶剂种类 2.化合物结构 （1）形成氢键的基团越多，吸附越牢。 （2）形成氢键基团的位置不同，吸附强度不同。 （3）芳香化程度越高，共轭程度越多吸附性越强。 （4）形成分子内氢键则吸附强度减弱。 四、离子交换色谱法 六、凝胶色谱法 1.分类 2.分离原理 3.应用 七、高效液相色谱法 八、气相色谱法 纯度确定--最基本的条件 检查纯度的方法： ? 外观、颜色、形态是否均一； ? 测定各种物理常数，如熔点、沸点、比旋光度、折光率等，这些物理常数都反映了化合物的纯度。 ? 如果可能是已知物，用已知结构的对照品进行对照测定或测定它们的共熔点等； ? 也可对照文献报导值（注意各种测定条件的一致性） ? 薄层层析（三种展开系统和三种显色方法） ? 高效液相层析； ● 某些成分或功能基，可以和一些特定试剂产生各种颜色或沉淀，有助于判断化合物类型和功能基： ? 生物碱类大都能和生物碱沉淀试剂产生沉淀； ? 羟基葸醌类遇碱呈红色； ? 盐酸一镁粉试剂能和许多黄酮类化合物呈色。 ● 鉴别功能基的化学反应： ?三氯化铁反应、三氯化铝反应等等。 ?利用在酸水或碱水中的溶解度情况，提示该化合物碱性功能基或酸性功能基的存在以及有无内酯、内酰胺结构。 ?利用在酸水或碱水中的溶解度情况，提示该化合物碱性功能基或酸性功能基的存在以及有无内酯、内酰胺结构。 ● 化学降解法 ? 将复杂分子通过氧化、还原等化学反应，降解为几个结构比较简单又稳定的小分子化合物，通过对降解产物的结构鉴定，再按降解机理合理地推导出原来可能的化学结构式。 化学降解法 ● 特点： ? 需用化合物量大； ? 反应剧烈； ? 主要产物得率少又费时； 现在较少应用，仅保留一些比较简单规律性又较强的降解反应 ● 衍生物制备－用化学方法研究结构的一种常用手段，对结构推定有一定意义。 紫外光谱 用波长在200～400nm之间的连续光扫描记录下来的图谱，吸收带比较宽； 红外光谱 用波长在800nm～20μm之间的连续光扫描记录下来的图谱，谱线比较尖锐； 测定范围：波数200～400nm 之间 作用： ? 提供基本骨架信息; ? 样品中杂质的测定 ? 定量分析 特点： ? 液态样品才能测定； ? 常规紫外光谱仪价格低廉； ? 样品用量少（只需5-10 μg） 生色团 产生紫外吸收的不饱和基团，如C=C, C=O, O=N=O等； 助色团：其本身是饱和基团（常含有杂原子），它连到生色团上时，能使后者吸收波长变长或吸收强度增加，如-OH, -NH2, -Cl等； 深色位移：由于基团取代或溶剂效应，最大吸收波长变长，也叫红移（red shift）； 浅色位移：由于基团取代或溶剂效应，最大吸收波长变短，也叫蓝移（blue shift）； 具有相同基本骨架化合物的UV光谱相同，但并非是同一化合物； 测定范围 波数600～4000cm -1之间，其中1600cm-1以上为化合物的特征基团区，1000-500cm-1为指纹区。 作用 主要用于定性分析，功能基的确认，芳环取代类型的判断等。 优点