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专题1 基因工程 判断下列说法是否正确： 1．(2010·浙江理综卷，2·D)用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞( ) 2．(2011·四川理综卷，5·D)应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达( ) 3．PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA( ) 4．基因表达载体的组成有目的基因、标记基因就可以了( ) 一、基因工程 1．概念：指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 和 等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 2．其操作水平在 上进行设计和施工。 3．操作环境是在 。 二、基因工程的基本工具 1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)作用特点：能够识别DNA分子 ，并使特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 (2)作用结果：产生 或 。 2．DNA连接酶——“分子缝合针” (1)作用：将 拼接成新的DNA分子。 3．基因运载体——“分子运输车” (1)作用：将 送入受体细胞中。 (2)载体的种类： 、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 (3)载体的特点 ①能够在细胞内 。 ②具有一个或多个 ，便于供外源DNA片段插入其中。 ③具有特殊的 ，供重组DNA的鉴定和选择。 DNA连接酶连接的是DNA片段，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。DNA聚合酶是在DNA复制时连接脱氧核苷酸的酶。 三、基因工程的基本操作程序 1．获取目的基因，常用的方法有从基因文库中获取，利用 扩增；化学方法人工合成。 2．基因表达载体的构建 基因表达载体的组成：除目的基因外，还必须有 、终止子和 等。 (1)启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因首端，是 识别和结合的部位。 (2)标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有 ，从而将含 的细胞筛选出来。 3．将目的基因导入受体细胞 将目的基因导入植物细胞采用最多的是农杆菌转化法，还有 等；将目的基因导入动物细胞最常采用的方法是 ；将目的基因导入微生物细胞常应用大肠杆菌为受体细胞。 4．目的基因的检测与鉴定 首先，要检测转基因生物染色体DNA上是否插入了 ，其次，还需要检测是否 ，最后，检测 。 四、基因工程的应用 1．动物、植物基因工程的成果 2．基因工程药物：利用转基因工程菌，已生产出细胞因子、抗体、疫苗、激素等。 3．基因治疗 (1)概念：把 导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。 (2)方法：分为体外基因治疗法和体内基因治疗法。 (1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是DNA一条链中相邻核苷酸间的磷酸二酯键，只是一个切断，一个连接。 (2)在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。 1．下列有关基因工程叙述错误的是(　　) A．最常用的载体是大肠杆菌的质粒 B．工具酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶 C．该技术人为地增加了生物变异的范围，实现种间遗传物质的交换 D．基本原理是DNA具有双螺旋结构以及遗传信息传递和表达方式相同 解析： 基因工程的基本原理是基因重组，不同生物的DNA具有相同的结构以及遗传信息传递和表达方式相同是基因工程赖以完成的基础；基因工程中的工具酶是限制性内切酶和DNA连接酶，最常用的载体是大肠杆菌质粒。该技术可克服生殖隔离现象，实现种间遗传物质交换，按照人的意愿使生物发生变异。 答案：　D 1．目的基因的获取 (1)从基因文库获取，原核基因也可直接分离获得。 (2)真核基因主要是人工合成，常用方法有反转录法和化学合成法。 (3)PCR技术扩增目的基因 ①原理：DNA的复制。 ②过程：加热至90～95 ℃DNA解旋→冷却到55～60 ℃，引物结合到互补DNA链→加热至70～75 ℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 2．基因表达载体的构建 (1)基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子以及标记基因等。 (2)基因表达载体的构建方法 3．将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测和表达 (1)只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤都涉及碱基互补配对。 (2)目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。 转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。 (3)用微生物作受体细胞的主要原因是因为它个体微小，代谢旺盛，繁殖速度快，获得目的基因产物多。 2．某研究小组为了研制预防禽流感病毒