分子荧光(本)讲述.pptVIP

2.激发态→基态的能量传递途径 蛋白质内源荧光 蛋白质在270-300nm有吸收，这种吸收主要来自色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸，所以蛋白质具有天然荧光。当用280nm波长激发时，蛋白质大致有相同的荧光光谱，最大值在313nm和350nm处。前者恰与酪氨酸一致，后者恰与色氨酸一致，没有色氨酸的组蛋白只给出最大在313nm的荧光光谱，没有芳香族氨基酸的蛋白质不显示荧光。 6 分析方法1）定量分析 标准曲线法 配制一系列不同浓度的标准溶液，测出各自的IF后，作出 IF — c 曲线或获得线性回归方程；在相同的条件下，测定样品的IF,x，得出样品的 Cx。 基线校正：为了使实验在不同时间所测得的数据前后一致，在测绘标准曲线时或在每次测定试样前，常用一个稳定的荧光物质的标液作基准校正。 标准对照法 若曲线通过原点，且完全符合浓度的线性范围，用标样对照测定试样的浓度表达式为： ? 仪器光路图 同步扫描技术 可获得三维光谱图的仪器 6.2共振瑞利散射光谱 一 共振瑞利散射的形成： 光散射是指光通过介质时在入射光方向以外的各个方向上所观察到的发光现象。介质分子由电子和原子核组成。光电磁波的电场振动导致分子中电子产生受迫振动形成偶极子。根据电磁理论，振动着的偶极子是一个二次波源，它向各个方向发射的电磁波就是散射