2电离辐射的分子生物学效应分析.pptVIP

? DNA的损伤修复机制 1、回复修复 细胞对DNA的某些损伤可以用很简单的方 式加以修复在单一基因产物的催化下，一 步反应就可以完成。这种修复方式叫回复。 ? ? 1）酶学光复活 光复活酶或DNA光解酶 它的作用分成三个步骤：①酶与DNA中 的二聚体部位相结合；②吸收波长为 260～380 nm的近紫外光，酶被激活， 使二聚体解聚；③酶从DNA链上释放， DNA恢复正常结构。 ? ? 2）DNA单链断裂重接 DNA单链断裂中有一部分是通过简单的 重接而修复的，只需要一种酶——DNA 连接酶(ligase)参加，因此也属于直接 回复。 DNA连接酶能催化DNA双螺旋结构中一条 链缺口处的5’磷酸根与相邻的一个3’羟 基形成磷酸二酯健。连接所需的能量 ATP(如动物细胞)。 ? ? ? 3）嘌呤的直接插入 嘌呤插入酶 受损嘌呤→APS →插入嘌呤（糖苷键） K+ 糖基化酶 嘌呤插入酶 ? ? ? ? 2、切除修复 将损伤的部位（或连同其附近的一定部位）切 除，然后用正确配对的、完好的碱基替代修复。 有多种酶和基因参与 过程：识别（损伤位点 →切除→修复（补） 连接 DNA连接酶 酶和蛋白质 DNA聚合酶 两个特点:准确、正确修复。 ? ? ? ? 1)碱基切除： 特点是切除受损伤的碱基。主要过程是水解受 损伤的碱基与脱氧核糖磷酸链之间的N—糖苷键。 反应由一类糖基化酶催化。 也即：糖基化酶→APS→内、外切酶去除残基。 整个修复过程可分以下几步。 ? ? ? ? ? ? 2）核甘酸切成（一段寡核苷酸） 首先由一个酶系统识别损伤； 然后在损伤两侧各水解一个磷酸二酯键； 释放出一段寡核苷酸； 填补缺损区 连接酶重新完成连接。 ? 3、多聚ADP-核糖的作用 ADP－核糖基多聚物的形成与存在是提高 连接酶活性的重要因素，在DNA损伤修复 过程中起着重要作用。 ? ? 4、损伤的“耐受” DNA分子的损伤有时不能立即修复。特别是 在复制已经开始，而损伤又在复制叉附近 时，细胞会通过另一些机制，使复制能进行 下去，待复制完成后，再通过某种机制修复 残留的损伤。复制时损伤并未消除，故称 “耐受”。 包括重组修复（复制后修复）、SOS修复 ? ? 1）、重组修复 当DNA双链发生严重损伤时需要另一种机理来 完成正确的修复。一种情况是两条链同时受 到损伤；另一种情况是单链损伤尚未修复时 发生了复制，造成对应于损伤位置的新链缺 乏正确模板；此时需要重组酶系将另一段未 受损伤的双链DNA移到损伤位置附近，提供正 确的模板，进行重组。这便是重组修复。 ? ? ? 2）SOS修复 细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制，产生 一种调控信号，解除对许多基因的抑制，这些 基因的产物参与修复过程。 SOS修复过程是在损伤信号诱导下发生的，又 称可诱导的DNA修复。 修复过程容易发生错误，故又称易错修复。 ? ? ? ? ? 4、错配修复 错配修复是生物维持生命、保持物种稳定的— 种重要功能。从细菌、酵母直至哺乳动物都普 遍具有此修复机理。 在修复、重组的过程中或外界损伤因子的作用 下都有可能发生错配。在修复过程中首先要识 别错配碱基对。 然后需要分辨错配的哪一侧属于母链，哪一侧 属于新合成的错误链。最后修复。 错配纠正过程是很复杂的，至少需要10种活性 因子参加。 基因组修复的不均一性 ? 特点 1）转录活性DNA修复优于静止的基因 2）转录链优于非转录链－修复与转录偶联 ? ? 1、重复序列中的DNA修复 灵长类细胞基因组中存在一种高度重复顺序， 在非洲绿猴细胞中此顺序占总DNA的15％一 20％，碱基组成与总DNA相近，长度为 172bP，没有转录功能。 ? ? 2、活性基因中的修复 活性基因片段中二聚体的清除非常活跃， 如紫外线照射(20J2/M2)后8小时，已清除 47%左右。 3、活性基因中转录链的修复 转录链优先修复，其机制以转录修复偶联 因子的作用解释。 DNA修复基因 1、原核细胞的修复基因占基因组总量1％。 2、酵母有三组RAD基因（radiation sensitive 的前三个字母） 3、人类基因：1）XRCC （X-ray repair cross complementing）基因；2）ERCC ? ? ? ? ? 三、DNA损伤与修复的生物学意义 DNA结构的完整与稳定在生物学上有着特别重要 的意义。 在射线作用下，DNA碱基的损伤或脱落改变了密 码，引起基因的突变。导致细胞的突变或转化。 双链DNASSB能迅速修复，DSB经原位重接很少， 重组修复则易发生染色体畸变。 DNA交联会影响核小体及更高层次的染色质结 构，影响复制。 活性染色质的破坏影响基因的表达和调控。 ? ? ?