4DNA复制剖析.ppt

多起点、双方向（真核） 多起点、单方向（真核） 单起点、单方向（原核） 单起点、双方向（原核） 4.3.3 真核生物DNA复制的过程 SV40DNA的复制 SV40复制起点为64nt，有前期区、中心区和后期区三个功能区。前期区10nt，有不完全回文结构，与其相邻的是T抗原结合位点Ⅰ。中心区23nt，是T抗原结合位点Ⅱ。后期区有17nt的富含AT区，与其相邻的是21bp和72bp区，21bp区富含GC，是转录因子SP1的结合位点。 72bp区是转录和复制的增强子。单独缺失T抗原结合位点Ⅰ或21bp区，复制水平下降30%～50%，二者同时缺失，复制水平下降95%。 (1) 2分子由SV40基因组编码的T抗原六聚体 (相当于E.coli的DnaB蛋白)，在ATP的存在下与SV40复制起始区结合，使起始区的DNA解链。 (2) 复制蛋白A (replication protein A, RPA)作为SSB与单链区结合，提高T抗原的解旋酶活性，使解链区扩大，但RPA与单链DNA结合没有协同效应。 (3) DNApolα-引发酶复合物与T抗原/RPA复合物结合，合成前导链约10nt的RNA引物，和约30nt的DNA。 (4) 复制因子(replication factor, RFC)先与新合成的DNA