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- 2016-06-28 发布于安徽
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人头发毛囊组织DNA提取方法的研究
技术保障与研发部 魏宏泉
摘要 本研究以人头发的毛囊组织为材料,在动物组织总DNA提取的经典技术方案基础上,兼顾效率、成本和产率等三方面因素,对毛囊组织DNA提取方法进行了优化,并设计了实用有效的取样方法。研究结果显示,可以以少至一根带毛囊的头发为材料,在40分钟时间内获得约0.5(g组织DNA,其产量和质量可以满足基因检测工作后续流程的需要。同时,一次提取过程所耗药品试剂的成本约为0.3元,大大低于以微量血为材料的试剂盒提取法的成本。
在以RFLP法对线粒体12s rRNA基因1555位点进行基因检测的技术体系中,组织DNA提取是实验室工作的第一步,该工作的效率、质量、成本等因素对整体检测流程具有至关重要的影响。在此之前的研究工作中,我们确定了以微量血为材料提取组织DNA的技术方法,但为了使基因检测项目的实施具有更强的可操作性,设计多样化的组织样本采集形式则是必需的。为此,本研究以人头发毛囊组织为材料,旨在建立适用的取样方法和DNA提取方法的技术体系。
材料与方法
人头发毛囊组织
取自健康成年人。取样方法:用镊子夹住头发根部的部位,顺着毛发生长方向用力一拔即可,此时在毛发根部应明显可见白色或半透明的毛囊组织。然后用剪刀剪去大部分的毛干部分,将毛根带有毛囊组织的部分置于1.5ml Eppendorf管内。
试剂配制
Proteinase K
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