第二章蛋白质化学3-蛋白质结构与功能的关系2详解.pptVIP

凝胶电泳 （四）层析（色谱） 层析(chromatography)分离蛋白质的原理 当流动相带着待分离蛋白质溶液经过一个固态物质（固定相）时，根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电荷多少及亲和力等，使待分离的蛋白质组分在两相中反复分配，并以不同速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的 。 蛋白质分离常用的层析方法 * 离子交换层析：利用各蛋白质的电荷量及性质不同进行分离。 凝胶过滤(gel filtration)又称分子筛层析、分子排阻色谱等，是利用各蛋白质分子大小的不同进行分离的。 亲和层析：是吸附层析，依赖于蛋白质和其配体（ligand）之间的相互作用来实现分离的。 阳离子交换层析过程 离子交换树脂 蛋白质 高离子强度洗脱液洗 高离子强度洗脱液洗 加样 平衡液洗 收集 凝胶过滤层析过程 亲和层析过程 混合物中各组分在固定相和流动相之间会发生吸附、溶解或其他亲和作用，这种作用存在差异，从而使各组分在色谱柱中的迁移速度不同得到分离 分配层析（色谱） 根据流动相当不同可以分为气相色谱和液相色谱，液相色谱中最常用的是高压液相色谱 高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC) 也称高压液相层析（high pressure liquid chromatography）。这是近二十年内发展起来的一项快速、灵敏、高效的分离技术。它是