KPC酶研究进展说课.ppt

革兰阴性菌感染约占50% 碳青霉烯类抗生素是最后一道防线 碳青霉烯类抗生素耐药现象日益严重 碳青酶烯酶 碳青霉烯酶是指能够明显水解亚胺培南或美罗培南的一类β内酰胺酶,它包括Ambler分子分类为A、B、D三类酶 碳青霉烯酶的分类 KPC-1 1996年Yigit在美国北卡罗来纳州一株对碳青霉烯类药物耐药的肺炎克雷伯菌中发现，由质粒介导的碳青霉烯酶KPC-1(K. pneumoniae carbapenemase-1, KPC-1) KPC-1耐药表型表现出高度亚胺培南和美罗培南耐药性(MIC都为16μg/ml) 氨基酸序列分析显示, KPC-1 与SME-1、NMC-A、IMI-1分别有45% 、44%、43%的相似性 （SME-1、NMC-A、IMI-1之间的氨基酸相似性90%），可能是KPC-1与这3种酶不是由同一基因分化而来 KPC-2 2002年报道， Yigit等在一株对多种β -内酰胺类药物和亚胺培南耐药的肠炎沙门菌检检出KPC-2酶。 2003年，又报道了在一株产酸克雷伯菌中检测到KPC-2酶 2008年Yigit在AAC上进行修正说明，认为KPC-1的650-652的碱基（编码174位氨基酸）由文献上报道的AGC（编码丝氨酸）更正为GGC（编码甘氨酸） 由此得出结论，KPC-1和KPC-2是同一种酶 等电点是6.7 KPC-3 2000年4月至2001年4月，纽约TISCH医院的ICU病房有24名病人被感染了亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌，这是首次报道碳青霉烯类药物耐药的肺炎克雷伯菌引起的医院性感染 PFGE证实了此次医院感染是由3个不同的克隆株引起 PCR扩增发现了一种新的KPC酶——KPC-3，由75kb的质粒编码，可以接合转移 KPC酶 KPC-3和KPC-2相比有1个碱基的改变 以后的文献又陆续报道了KPC-4、KPC-5和KPC-6 氨基酸结构序列研究显示，KPC-5、KPC-6被认为是KPC-2到KPC-4的过度体 KPC酶之间核酸、氨基酸的差异 KPC酶 KPC酶之间的关系： KPC酶 据文献报道，3种KPC酶都需要合并膜孔蛋白OmpK35的缺失,引起细菌对碳青霉烯类药物耐药 KPC酶的传播 ?KPC酶的传播机制还不是完全清楚 有限的DNA指纹和脉冲凝胶电泳资料显示与医院感染有关。 最早在美国、特别在美国的东北部各州蔓延，并造成局部地区暴发流行。 以后几年再世界各地都有报告。 KPC酶的传播 研究认为，blaKPC位于一种新型的Tn3型的转座子Tn4401上，其转座子的结构是KPC基因转移的原因 这种新型的转座子结构可以使blaKPC从其原始位置转移至各类不同的质粒 同时认为转座子Tn4401是一个复合转座子，由2次序列插入形成 KPC酶的传播 接合实验 肺炎克雷伯菌（A1500）、肺炎克雷伯菌（A1500）和粘质沙雷菌S1筛选实验成功，筛选出其接合子，无丙二酸盐枸橼酸杆菌（C1）筛选实验失败，没有筛选出接合子 等点聚焦电泳证明实验菌和接合菌都有pI为6.7的β-内酰胺酶 产KPC酶菌株及其接合菌的药敏结果 两株肺炎克雷伯菌的RAPD分析 对上海地区分离的肺炎克雷伯菌（A1500）和浙江地区分离的肺炎克雷伯菌（K1）做随机扩增的多态性DNA（ RAPD）分析，证明两株菌株不是同一克隆型 疾病与治疗 KPC-producing organisms have been implicated in a variety of infections including bacteremia, ventilator-associated pneumonia, urinary tract infection, and central venous catheter infection. Selection of antibiotic therapy should be tailored to antimicrobial susceptibility results for agents outside the beta lactam and carbapenem classes. In addition, antibiotic susceptibility testing should be requested for tigecycline, colistin and aztreonam. 危险因素 Use of broad spectrum cephalosporins and/or carbapenems is an important risk factor for the development of colonization or infect