MS基础知识说课.ppt

（3）多反应监测Multiple Reaction Monitoring (MRM) 母离子和子离子均选定，定量专用 母离子分析可用来鉴定和确认类型已知的化合物，尽管它们的母离子的质量可以不同，但在分裂过程中会生成共同的子离子，这种扫描功能在药物代谢研究中十分重要。 （4）母离子扫描PAR Scan （5）子离子扫描DAU Scan 选定一个母离子对这个母体产生的所有碎片信息进行记录。这种扫描功能在药物代谢研究中十分重要。 中性丢失扫描分析可用来鉴定和确认类型已知的化合物，例如新生儿遗传疾病筛查中某些检测项目。也可以帮助进行未知物结构判断。 (6)中性丢失扫描CNL Scan 质量数 中性丢失 质量数 中性丢失 2 H2 HCHO 17 NH3 34 H2S 18 H2O HCl HF 44 CO2 HCN 74 C3H6O2 28 CO/C2H4 80 HBr 注意事项 1.定量都是用MRM模式 要注意两个关键参数毛细管电压和裂解电压 2.定性会用到所有的功能 仍然要注意裂解电压，如果做代谢的话有用到很多常量参数 接触的质谱LC-IT/MS LC-IT/MS：Thermo LCQ Fleet LC/MS，是美国Thermo公司产品，离子阱质谱仪 SIR MRM MS(n) Auto MS(n) 离子阱的信号衰减，一般做到4-5级 1/3 cut-off of mass-to-charge ratio 接触的质谱LC-IT/MS 如何选择 LC-MS LC-MS/MS LC-IT/MS LC-Q/TOF ------- 空间上串联 时间上串联 空间上串联 主要功能 Full Scan SIM Full Scan SIM SRM PAR scan DAU scan CNL scan Full Scan SIM SRM MS(n)(n=1-5) Auto MS(n) Full Scan SIM SRM MS(2) Auto MS(2) 特点 价格实惠 MRM灵敏度高 多级信息，全扫描灵敏 精确分子质量，高分辨 适用性 均一般 定量(某些定性) 定性 定性，大分子 分析条件的移植 1.接口的选择： ESI APCI 2.正、负离子模式的选择： 正离子模式：适合于碱性样品，可用乙酸或甲酸对样品加以酸化。样品中含有仲氨或叔氨时可优先考虑使用正离子模式。 负离子模式：适合于酸性样品。样品中含有较多的强伏电性基团，如含氯、含溴和多个羟基时可尝试使用负离子模式。 3.流动相的选择 常用的流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同比例的混合物 LC-MS接口避免进入不挥发的缓冲液，避免含磷和氯的缓冲液 甲酸（乙酸）＜ 0.2％ 三氟乙酸 ≤ 0.1％。 含三乙胺 ＜ l％。 醋酸铵 ＜ 5-10 mmoL/L 4.流量和色谱柱的选择 ESI的最佳流速0.2-0.3 mL/min 应用4.6 mm内径LC柱时要求柱后分流目前大多采用 1-2.1 mm内径的微柱 APCI的最佳流速0.8-1 mL/min，常规的直径4.6mm柱最合适 样品的预处理常用方法 a）超滤 b）溶剂萃取/去盐 c）固相萃取 d）甲醇或乙腈沉淀蛋白 e）酸水解，酶解 f）衍生化 分析条件的移植 基质效应 matrix effect 离子抑制 原因：生物样品中内源性物质影响分析物离子化 后果：使信号强度下降，甚至消失 发现： 配制生物样品，与溶液样品对比 解决方法：改进样品预处理方法；色谱分离 LC-MS中常见的本底离子 m/z 50-150, 溶剂离子，[(H2O)nH+ ，n= 3-112] m/z 102, H+乙腈 +乙酸, C4H7NO2H+,102.0549