第八章：蛋白质的结构和功能(12学时)详解.doc

第八章：蛋白质的结构和功能（12学时） 第一节：活性蛋白质与前体（pp277-285） 例如： 酶原 ( 蛋白酶； 激素原 ( 激素，或者：前激素原 ( 激素原 ( 激素 激素与激素原（pp277-279） 提取和确定前体的方法：前体不表现生物活性，活性测定的方法无效。 ⑴ 免疫复合物提取法（主要方法，例如胰岛素前体的提取），步骤如下： 制备抗激素抗体：以激素作为抗原，注射到实验动物体内，待动物产生相应的抗体后，抽取血清，提取具有交叉反应性的抗激素抗体。 找出无活性的蛋白质：利用激素原能和“抗激素抗体”形成免疫复合物的特性，将抗激素抗体与产生激素的腺体的组织匀浆混合，分离提取免疫复合物，找出无活性的蛋白质，即为可疑的激素原。 鉴定激素原：对这种无活性的蛋白质测序，与相应的激素的一级结构对比，就能推断是不是该激素的前体。 ⑵ 重组DNA译码法：例如“前脑啡肽原”的确定 前体与激素在一级结构方面的关系：见227页表8-1。 前体部分序列与激素相同，或者说，激素的序列包含在前体的序列之中。 ㈠ 胰岛素与前体 胰岛素的分布、功能和来源：主要作用于肝、肌肉、脂肪组织，参与糖代谢，有平衡血糖的作用。作为糖尿病的特效药，在临床医学上广为应用。胰岛素原由胰腺中胰岛β细胞产生。 胰岛素的活化过程：（见278页图8-1和8-2） 前胰岛素原： 信号肽—B-链—C-肽链—A-链（105肽） ( 信号肽酶 ( 切下 信号肽（24肽） 胰岛素原： B-链—C-肽链—A-链（81肽） ( 类胰蛋白酶+类羧肽酶 ( 切下 Arg31, Arg32, Lys59, Arg60和C链 胰岛素： 胰岛素（A-链+B-链）（21肽+30肽） C肽的作用：① 便于生物合成；② 利于二硫键正确配对。 信号肽的作用：在新生肽链的传送过程中起识别和导向的作用。 ㈡ 脑啡肽与前体 脑啡肽的分布和功能：脑啡肽存在于脑区，与脑细胞的专一性受体结合，对机体具有强烈的镇痛作用。 脑啡肽的种类： 甲硫脑啡肽： Tyr-Gly-Gly-Phe-Met C端为甲硫氨酸； 亮脑啡肽： Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu C端为亮氨酸。 前脑啡肽原的一级结构特征：（见280页图8-3） ① 全长267个氨基酸残基（人体）； ② 信号肽段1个：位于1~24； ③ 甲硫脑啡肽(MEK) 4个：位于100~104、107~111、136~140、210~214； ④ 亮脑啡肽（LEK）1个：位于230~234； ⑤ 甲七肽（MEK-RK）1个：位于261~267； 甲八肽（MEK-RGL）1个：位于189~193； 酶切位点（配对碱性残基）：三种（Lys-Arg；Lys-Lys；Arg-Arg），12个。 脑啡肽结构与功能的关系： Tyr1： 以甲氧基取代酚羟基，失去活性；前面加一个Arg，活性下降； Gly2： 改为D-Ala（D型丙氨酸），则镇痛作用大大提高； Gly3： 为活性必需的，不能被取代； Phe4： 可被Trp或者N-CH3-Phe取代；但不能被Tyr和Leu取代； Met5： 去除则活性下降；延长一个Thr，则活性不变。 酶与酶原（pp279-283） 体内蛋白酶的来源和功能： 胃和胰脏：产生消化食物蛋白质的酶； 血液：产生导致血液凝固的蛋白酶。 酶原的概念： 酶的前体，含有酶的一级结构的氨基酸残基序列，但是由于多余肽段的存在，没有形成活化中心的立体结构（功能域），因而不具有催化活性。在生理活动需要时，在其他酶和/或因子的作用下，切去多余的肽段，形成酶。 10种酶原激活的条件和过程： 见281页，表8-2。 ㈠ 胰凝乳蛋白酶原的激活 1． 激活过程：（282页，图8-4） 胰凝乳蛋白酶原： 单链，245肽，5对二硫键 ( 胰蛋白酶 ( Arg15—Ile16之间切断 π-胰凝乳蛋白酶： 双链，15肽+230肽，酶活性最高，但不稳定 ( π-胰凝乳蛋白酶（自身激活）切开三处 (释放2个2肽:Ser14-Arg15；Thr147-Asn148 α-胰凝乳蛋白酶： 三链：A链、B链、C链，稳定，但活性较低 2． 活化中心的形成：（催化部位变化不大，结合部位从无到有） 催化部位（Asp102、His57、Ser195）：酶原和酶的分子构象非常相似，活化中心的催化部位具有相同的取向（282-283页，图8-5 A. 和 B.）。 ② 结合部位（189~192位口袋）：是酶原中不存在的 (283页图8-6）。 胰凝乳蛋白酶结合部位形成的机理： Ile16氨基质子化：15-16切开后，Ile16与Asp194羧基形成离子