阜阳市中考满分作文-2012复习题.doc

1、检测某一个特定CpG岛甲基化的方法有哪些，各有什么优缺点？ 方法 优点 缺点 Southern blot 方法简单，成本低，甲基化位点明确 需大量DNA，灵敏度差 Bisulfite-Sequencing 可确定具体的甲基化位点，是甲基化检测金标准； 费时，且花费高； COBRA 简便易行，甲基化位点明确 单个或几个CpG点检测，不能反应总体；电泳检测，敏感性低 DHPLC 灵敏度高，可定量；可反应整个片段甲基化情况 不能确定发生甲基化的具体CpG位点 MSP 简便易行，灵敏度高 单个或几个CpG点检测，不能反应总体甲基化情况 MethyLight 灵敏度高，可定量 单个或几个CpG点检测，不能反应总体甲基化情况 2、DNA甲基化的应用特点？ 与序列变异相比: 同样重要，但更易检测--CpG岛甲基化只有两种情况：有或无； 而DNA结构变异有无数种； 与mRNA和蛋白质相比： 检测灵敏--可反映个别细胞的变化； 稳定性高--可检测石蜡组织标本，具有资源优势； 可逆性：DNA甲基化具有可逆性，可作为新治疗靶点。 影响因子的英文？计算公式？ 影响因子：Impact Factor（IF） IF=期刊前两年发表文章在数据库中的总被引次数/期刊前两年发表的文章总数 变性高效液相色谱(DHPLC)技术在肿瘤研究中的主要应用 5、 什么是流式细胞术，请列举至少一种流式细胞仪在肿瘤研究中的应用 答案：（1）利用流式细胞仪对处在快速、直线、流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速定量分析，同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术，成为流式细胞术。流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机术、细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的一种新型高科技仪器。 （2）周期的检测: 细胞周期和细胞倍体的分析是肿瘤研究中重要的研究手段，广泛应用于基础和临床研究中。可通过PI染色进行流式检测细胞周期是流式细胞仪在肿瘤研究中的一大应用。 凋亡的检测： 诱导肿瘤细胞凋亡以控制恶性肿瘤生长并研制开发凋亡相关新药。Annexin Ⅴ/PI检测凋亡是流式常用方法. Treg的检测: Treg是一类具有调节功能的T细胞群体，CD4+CD25+FOXP3+是这类细胞的特异性标志，常常利用流式细胞仪进行检测。 肿瘤干细胞和SP细胞：肿瘤干细胞表面标志物的筛选，sp细胞的检测都是利用流式细胞仪完成。 6. 说说自己的课题中哪些实验会用到流式至少列举一项 答案：跟自己课题相结合，谈谈流式。自由发挥。 9.抗原修复有哪几种方法？ 胰酶 胃蛋白酶 微波 高压锅 102.免疫组化技术的优点有什么？ 方法简单，易掌握 在组织切片原位显示抗原的表达情况 试验条件要求不高，绝大多数实验室都可满足其需要。 不需要特殊、贵重的仪器。 11. 非特异性染色的消除方法有哪些？ *最大限度稀释抗体 *BSA阻断 *二抗同种属正常血清阻断 * 5%脱脂奶 12. 免疫组化染色阳性的判定标准是什么？ 通常以阳性细胞占所有细胞的10%以上定为阳性，如散在表达或表达量低时，也有选择5%阳性为阳性标准。 根据染色的强度，分为+，++，+++。 13、影响细胞培养成功与否的因素有哪些？ 14、列举常见的细胞培养的污染 15、在基因克隆中常用的酶类都有哪些？各有什么作用？ 16、生物质谱在蛋白组学中的应用？ 17、双向电泳的定义并简述以细胞为样本做双向电泳的实验步骤。 18、简述SDS电泳的基本原理。 19、试述激光扫描共聚焦显微镜成像基本原理及其在生命科学中的应用。 20、分离纯化蛋白质的方法有哪些 1.动物实验伦理的3R原则？ 答：减少、代替、优化 2.实验动物质量控制的4大方式？ 答：a、优良的种质资源 b、严格的繁育方式 C、全面的环境控制 d、可靠的监测手段 3、简答：活体成像仪的7大优点。 答：人道性、非侵害性和快捷性、高系统灵敏度、 成像视野多角度选择性、 成像的精确性、高分辨率和检测率、广泛的应用性。