出凝血实验重点介绍.pptVIP

出凝血相关实验 止血机制 　　当血管发生破损时，首先是局部血管发生短暂地收缩，使血流变缓，破损伤口缩小，之后血管内皮细胞表达并释放出vWF粘附于暴露的胶原组织上，血小板通过膜糖蛋白GPⅠb与vWF相连接而粘附于胶原纤维，同时血小板以膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物为纤维蛋白原的受体，通过纤维蛋白原介导血小板间的聚集，在ADP、肾上腺素、胶原、凝血酶等诱导剂的参与下，聚集的血小板释放出ADP、5-羟色胺、血栓素A2、β-血小板球蛋白等，导致血小板非可逆性聚集,形成血小板血栓。同时，血管受损后暴露的胶原纤维和释放的组织因子，启动内源性和外源性凝血途径,形成牢固的止血血栓，血小板释放出血栓收缩蛋白，使血块退缩，加强止血作用，使出血停止。 凝血机制 抗凝机制 　　抗凝血酶Ⅲ是人体内最重要的抗凝物质，主要由肝脏及血管内皮细胞产生。它在肝素的辅助下，主要与活性因子Ⅹ和凝血酶结合为复合物，抑制活性因子Ⅹ和凝血酶的凝血作用.　 蛋白C系统 由蛋白C、蛋白S及血栓调节素等组成。蛋白C和蛋白S在肝内合成，血栓调节素主要存在于血管内皮细胞表面，凝血酶与其结合后，即失去了它原来的凝血活性，并可激活蛋白C，使之变成活性蛋白C，再通过Ca2+与内皮细胞上的蛋白S结合成活性蛋白C-蛋白S复合物，灭活因子Ⅴ和因子Ⅷ，发挥抗凝作用。 　　 组织因子途径抑制物(TFPI)为一种对热稳定的糖蛋白。内皮细胞可能是其主要产生部位。 　　　　　　　TFPI的抗凝机制：　　 　1、有直接抗FⅩa作用。　　 　2、在Ca2+存在的条件下，有抗TF/FⅦa复合物作用。　　纤溶机制 当血管受损启动内外源性凝血过程时，FⅫa和激肽酶可将纤溶酶原激活为纤溶酶。血液中的链激酶和尿激酶等物质也可将纤溶酶原激活。血管损伤部位分泌的组织型纤溶酶原激活物（t-PA），特异性的同纤维蛋白结合，再与纤溶酶原结合，激活纤溶酶原为纤溶酶，大大加快了纤溶酶分解纤维蛋白的作用。  出血时间测定 　　 ※基本原理 　　 皮肤毛细血管被刺破后出血自然停止所需的时间称为出血时间。出血时间的变化主要受血小板数量和功能的影响，其次是血管壁的完整性和收缩功能。血浆凝血因子的影响较小。※简要步骤 　　　　 出血时间测定器测定法：将出血时间测定器（双刀片或单刀片弹簧装置）在肘窝下2横指处常规消毒后贴于皮肤表面，按动按钮，开动秒表计时。 ※实验结果　　参考值：2～6分钟 ※临床意义　 　　出血时间延长见于：　　1、血小板明显减少或功能异常 如原发性血小板减少性紫癜、血小板无力症等；　　2、严重缺乏血浆有关因子 如vWD 、DIC；　　3、其他异常，如：遗传性出血性毛细血管扩张症、服用抗血小板药物 ※基本原理　 　　 静脉血放在玻璃试管中，观察自采血开始至血凝所需的时间称为凝血时间。本试验反映自因子Ⅻ被负电荷表面激活，至纤维蛋白形成所需的时间，主要反映内源性凝血过程有无异常。 ※简要步骤 　　抽静脉血3ml分别注入3支小试管内。置37℃水浴中，3分钟后每隔30秒钟轻轻倾斜第1支试管1次，直至血液不再流动为止，依次倾斜第2和第3支试管，记录第3管血液凝固所需时间。 ※实验结果 　　参考值： 　　玻璃试管法 4～12min ※临床意义 　　凝血时间延长见于　 　　1、因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ明显减少　如血友病、血管性血友病等； 　　2、凝血酶原和纤维蛋白原高度减少　如严重的肝病、阻塞性黄疸、先天性纤维蛋白原减少症等；　 　　3、纤溶亢进；　　 　　4、循环抗凝物质增多及使用 活化部分凝血活酶时间测定 ※基本原理　　 部分凝血活酶(脑磷脂)可代替血小板3因子参与FⅨ和FⅩ的凝血作用。本试验是在血浆中加入APTT试剂(接触因子激活物+磷脂)和Ca2+后,测定其凝血时间。本试验是反映内源性凝血功能的综合性检查。如以白陶土(Kaolin)作为接触因子激活物时，亦可称为白陶土部分凝血活酶时间(KPTT). ※简要步骤 　　 　　　 　取抗凝血,分离血浆,加APTT试剂，37℃温育3分钟后加Ca2+,记录血浆凝固所需时间。 ※实验结果　 参考值: 30～45秒。与正常对照相差在5秒以内为正常，延长10秒以上为异常。 ※临床意义　 　1、APTT延长见于：　　　　（1）先天性凝血因子异常：血友病，血管性血友病、接触因子Ⅻ缺乏；　　（2）多种凝血因子缺乏（后天性），如严重肝病、维生素K缺乏、DIC等；　　（3）循环抗凝物质增加，如系统性红斑狼疮。 　　2、APTT缩短见于：　　高凝状态：如DIC高凝期和凝血因子活性增高等；血栓性疾病：如心肌梗死、脑血管病变、糖尿病、肾病综合征、妊娠高血压综合征等 凝血酶原时间测定 ※基本原理　　　 　在被检血浆中加入因子Ⅲ和Ca2+后，激活凝血酶原，使纤维蛋白