第1章 概述讲义.ppt

课程特点 1. 涉及学科多，适用面广 2. 起点高、发展快、内容新颖 3. 理论与实际联系密切 4. 具有理学和工程学的特点 参考文献 1. 分子克隆操作指南(1982和1989年版) 2. DNA Cloning (Vol.1-4, 1996) 3. 酶学方法—相关卷 4. 国外生物技术公司产品目录和定期出版物 5. Internet 相关网址 三大重中之重高技术 生物技术（BT） 信息技术（IT） 新材料技术（纳米技术，NT） 生物技术概念与特征 定义： 利用活体生物或它们的产物来生产或修饰一种产品以改良植物和动物、或发展具有特殊用途的微生物的技术。 特征： 21世纪最具潜力的高新技术 多学科、交叉、综合的技术 影响最为深远最广泛的技术 生物技术与生物工程的区别 Biotechnology and Bioengineering 生物技术侧重于利用生物学方法解决生物体本身的问题 生物工程则侧重于利用工程学方法解决生物学问题 绪论 一、什么是基因操作 二、基因的研究历史回顾 三、基因的现代概念 基因工程(gene engineering)常和以下名称混用: 遗传工程(genetic engineering); 基因克隆(gene cloning); 分子克隆(molecular cloning); 基因操作(gene manipulation); 重组DNA技术(recombination DNA technique) 克隆(clone): 作名词时指含有某目的DNA片段的重组DNA分子或含有该重组分子的无性繁殖系。 作动词时是指基因的分离与重组过程。 基因本身也是一个产业 Rockfeller 大学将人肥胖基因出售0.2亿美元（1995年3月） Amgen公司将FKBP神经免疫因子配体转让达3.29亿美元（1997年） Millennium公司以4.65亿美元向Bayer公司转让225种基因的开发权（1998年9月） 基因工程的概念 利用DNA体外重组或PCR扩增技术从某种生物基因组中分离感兴趣的基因，或是用人工合成的方法获取基因，然后经过一系列切割、加工修饰、连接反应形成重组DNA分子，再将其转入适当的受体细胞，以期获得基因表达的过程。 理论依据： 1. 不同基因具有相同的物质基础 2. 基因是可以切割的 3. 基因是可以转移的 4. 多肽与基因之间存在对应关系 5. 遗传密码是通用的 6. 基因可以通过复制把遗传信息传给下一代 基因工程的技术流程 1. 目的基因的克隆 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 来源： ⑴ 从供体细胞的DNA中直接分离基因 ⑵ 人工合成基因 2. 载体的准备 载体 (vector)：能携带外源基因（或DNA片段）进入细胞复制、整合或表达的工具。 例：质粒载体 λ噬菌体载体 M13噬菌体载体 人工染色体载体 3. 目的基因与载体的连接 4. 重组DNA的转化、转染、转导 常用的宿主细胞有： 大肠杆菌 枯草杆菌 土壤农杆菌 酵母菌 动植物细胞 5. 重组体的筛选和鉴定 6. 重组体的大量培养，外源基因表达效应分析与开发应用。 检测：通过检测标记基因的有无来判断目的基因是否导入。 表达：通过特定性状的产生与否来确定目的基因是否表达。 基因工程技术及其应用 生物制药产业化特点 高技术：高层次人才，高新技术手段，多学科渗透 高投入：在国外，一个生物药品平均要投入1~3亿美元，并随着开发难度的增大,有逐步增高的趋势 长周期：国际上，一个新的生物药品需要6~8年时间 高风险: 一个新药品的开发，经过一系列的程序-研发、中试、动物实验、I~III期临床实验，上市和严格的药政监督管理。每一步都可能失败，而前功尽弃 高回报: 开发成功一个新的生物药品, 回报很高。如美国Amgen公司，首次开发上市的EPO、G-SCF到1997年的销售额分别接近和达到20亿美元 基因工程试剂的高回报 碱性成纤维细胞生长因子 231元/ug 红细胞生成素 1072元/ug 白细胞介素-2 410元/ug 巨细胞粒细胞集