微生物细胞破碎2-4解析.pptVIP

4、植物细胞壁 构架物质：纤维素 基质：果胶 典型结构： 胞间层 初生壁 次生壁 非极性R基氨基酸：甘氨酸、丙氨酸 小分子氨基酸静电引力可以渗透过细胞壁中，通过氢键、范德华力、静电引力等化学亲和力改变细胞壁结构。 第三节 破碎率的测定及破碎技术  的研究方向 * 破碎技术研究方向-与下游工程相结合举例：萃取破碎法提取酵母醇脱氢酶 * （ inclusion bodies IBs) 第四节 包涵体的纯化 胞外分泌型表达：离心,收集液相→浓缩→纯化。 胞内表达： 胞内可溶性表达：离心,收集菌体→细胞破碎→离心，收集上清→纯化。 胞内周质表达：离心,收集菌体→低浓度溶菌酶或渗透压冲击等溶解目标物→离心,收集上清液→纯化。 不溶性包涵体：离心,收集菌体→细胞破碎→离心,收集沉淀→包涵体洗涤→目标蛋白变性溶解→复性→纯化。 * 生物分离过程的一般流程 本节内容 * 外源蛋白在大肠杆菌中的积累 蛋白 产物占菌体总蛋白 外源蛋白的积累 人胰岛素 50% 形成包涵体 β-丙酰胺酶 20% 在细胞间区 γ-人体干扰素 25% 形成包涵体 凝乳酶原 形成包涵体 牛生长激素 30% 形成包涵体 β-内酰胺酶 形成间区包涵体 人胰岛素原 5%~26% 形成包涵体 * 包涵体：一种蛋白质不溶性聚集体，包括目标蛋白、菌体