微生物学实验指导书解析.docVIP

实验一 土壤中微生物的分离 一、实验目的： 1、使学生熟悉土壤中微生物种类。 2、学会用稀释平板技术确定土壤样本中的细菌和真菌的数目。 二、实验原理： 土壤中含有大量的微生物，包括 、真菌、原生动物、藻类和病毒。尽管有如此多样性，细菌，包括霉菌样防线菌和真菌乃是最占优势的。 必须记住，土壤环境随地点不同而不相同；同一地点，不同时期的土壤环境也不一样。这样，像湿度、PH值、温度、氧气含量、土壤中有机和无机组成在确定特定样本的特定微生物中将是决定性的。 就像土壤不同一样，用于分析土壤的微生物学方法也不同。一个单一的技术是不能用来对所给的土壤样本中不同类型的微生物进行分离计数的。本实验中确定的仅仅是细菌、防线菌、和真菌的相对数目。所用的方法是系列稀释平板法。为培养这三类微生物的生长，采用了不同的培养基：甘油醇母琼脂培养基用于防线菌分离；Saboruaud琼脂培养基用于真菌的分离；为了抑制细菌的生长，两种培养基都补以每毫升培养基10微克的金霉素。营养琼脂培养基用于细菌的分离。 三、实验材料： 土壤：1克充分碾碎的肥沃的花园土样本，放入装有99毫升无菌水的烧瓶中，标记为瓶1:1:100稀释度（10ˉ2）。 培养基：每个实验组：1瓶75毫升保持在45℃熔化的营养琼脂培养基；1瓶75毫升45℃甘油醇母琼脂培养基；1瓶75毫升45℃Sabouraud琼脂培养基。2瓶99毫升无菌水。 器材：酒精灯