果蝇总RNA提取.docVIP

果蝇总RNA和总蛋白的提取与电泳条带分析 摘 要：本实验第一部分用果蝇成体为材料，以Trizol为提取液提取total RNA，进行反转录制备cDNA，通过琼脂糖凝胶电泳检测total RNA和cDNA浓度，并结合电泳图谱对total RNA和cDNA图样进行分析；第二部分以果蝇幼体为材料，提取总蛋白，通过SDS检测果蝇总蛋白表达，对表达结果进行简要分析，并比较了成体和幼体果蝇的蛋白表达差异。 关键词：果蝇；total RNA；总蛋白；反转录；RT-PCR 1 前言 果蝇是一种非常重要的模式生物，通常所指的是黑腹果蝇，学名：Drosophila melanogaster，在分类学上所属动物界，节肢动物门，昆虫纲，双翅目，果蝇科，果蝇属。果蝇以其繁殖迅速、生长周期短、易于养殖、相对性状丰富、基因组较为简单等显著特点成为了遗传学、分子生物学、发育生物学等重要学科的主要实验动物之一，对果蝇基因组的测序分析也较为透彻，因此，本实验选用果蝇为实验材料，可以使数据更加具有代表性和说服力。 1953年Watson和Crick提出的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑开创了分子遗传学基本理论建立和发展的黄金时代，之后的二十年中，一系列的科学发现补充了中心法则的各个环节，由此进入现代分子生物学发展阶段，基因工程技术也应运而生。基因工程是利用重组技术，在体外通过人工剪切和拼接等方法，