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解析:选A。在基因工程中,通常用质粒作为载体。质粒是裸露的、结构简单、独立于细菌染色体之外,并能自主复制的双链环状DNA分子。在质粒上有一个至多个限制性核酸内切酶切割位点,供外源DNA片段插入其中,另外质粒上还有标记基因,如抗四环素基因等。 * * 第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生 核心要点突破 情景导引 基础自主梳理 知能过关演练 第一节 “转基因生物”一词越来越为人们所熟知,如转基因鱼、转基因棉等,这些生物都不同程度地影响着人们的生产和生活。 情景导引 思考:(1)转基因生物是利用什么技术获得的? (2)获得转基因生物所需要的特殊工具有哪些呢? 【提示】 (1)基因工程。 (2)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。 基础自主梳理 一、基因工程概述 1.概述:基因工程是狭义的遗传工程,广义的遗传工程泛指把一种生物的遗传物质移到另一种生物的细胞中去,并使这种遗传物质所带的遗传信息在_________中表达。 2.核心:__________________。 二、基因工程的诞生 1.时间:20世纪70年代。 受体细胞 构建重组DNA分子 2.理论基础 (1)DNA是生物遗传物质的发现。 (2)DNA双螺旋结构的确立。 (3)_____________传递方式的认定。 3.技术上的保障 限制性核酸内切酶、________________和质粒载体的发现与应用。 三、限制性核酸内切酶 1.功能:识别和切割DNA分子内一小段_________________。 2.结果:把_______________切割成许多不同的片段。 遗传信息 DNA连接酶 特殊核苷酸序列 DNA分子 思考感悟 1.限制性核酸内切酶的识别序列是GAATTC,只能在G和A之间切断DNA,对吗? 【提示】 不对。限制性核酸内切酶有数千种,其中一种限制性核酸内切酶的识别序列是GAATTC。 四、DNA连接酶 作用:将具有________________的2个DNA片段连接在一起,形成重组DNA分子。 五、质粒 1.实质:是能够自主复制的__________________,是一种特殊的遗传物质。 2.存在方式:在细菌中独立于染色体之外。 3.作用:作为基因工程的_______。 4.最常用的质粒:___________的质粒。 末端碱基互补 双链环状DNA分子 载体 大肠杆菌 思考感悟 2.基因工程的载体只有质粒一种,对吗? 【提示】 不对。最常用的载体是质粒。 核心要点突破 限制性核酸内切酶 1.特点:具有专一性表现在两个方面:如图 (1)识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列。 (2)切割特定序列中的特定位点。 2.用限制性核酸内切酶切割时断开的是DNA分子中的磷酸二酯键(即相邻脱氧核苷酸间的键)而不是连接两条链之间的氢键。如下图: 双链DNA结构和磷酸二酯键位置 3.产物:用同一种限制性核酸内切酶切割形成的DNA片段末端的碱基互补。 限制性核酸内切酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制性核酸内切酶BamH Ⅰ,EcoR Ⅰ,Hind Ⅲ以及Bgl Ⅱ的辨识序列。箭头表示每一种限制性核酸内切酶的特定切割部位,其中哪两种限制性核酸内切酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列是( ) 例1 A.BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ;末端互补序列 -AATT- B.BamH Ⅰ和Hind Ⅲ;末端互补序列 -GATC- C.EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ;末端互补序列 -AATT- D.BamH Ⅰ和Bgl Ⅱ;末端互补序列 -GATC- 【思路点拨】 【尝试解答】 __D__ 特别提醒 (1)限制性核酸内切酶是一类酶而不是一种酶。 (2)限制性核酸内切酶不是一般的DNA水解酶,限制性核酸内切酶只对DNA中特定的核苷酸序列识别和切割。 (3)限制性核酸内切酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4、5、8个碱基,都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 跟踪训练 限制性核酸内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断,如一种能对GAATTC专一识别的限制性核酸内切酶,打断的化学键是 ( ) A.G与A之间的键 B.G与C之间的键 C.A与T之间的键 D.磷酸与脱氧核糖之间的键 答案:D DNA连接酶 1.DNA连接酶与限制性核酸内切酶的比较 2.DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 DNA连接酶与DNA聚合酶都能催化两个核苷酸之间形成磷酸二酯键,但两者之间存在差异,表现如下: DNA连接酶 DNA聚合酶 连接DNA链 双链 单链 连接部位 在两DNA片段之间形成磷酸二酯键 将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3′端的羟基上,形成磷酸二酯键
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