201211140234植物组织培养副本解说.pptxVIP

第五章 植物组织培养 植物组织培养 5.1 植物分生组织培养 定义:对植物体的分生组织进行离体培养。分生组织包括茎尖分生组织、居间分生组织、侧身分生组织 分生组织培养 茎尖分生组织培养方法 芽的表面消毒 茎尖接种后的生长及调节 腋芽的生长和繁殖 茎尖的分离和接种 诱根和移栽 分生组织培养 影响分生组织培养的因素 培养基 外植体的生理状态 培养 条件 外植体大小 5.2 愈伤组织培养 本节主要内容： 一、愈伤组织培养的基本过程 愈伤组织形成的条件 愈伤组织的形成过程 愈伤组织的生长 愈伤组织的分化和形态发生 二、 影响愈伤组织培养的因素 外植体 培养基 植物生长调节剂 培养环境条件 植物组织培养 愈伤组织培养 植物组织培养（callus culture） 定义：将外植体接种到人工培养基上，在激素作用下，进行愈伤组织诱导、生长和分化的培养过程。 愈伤组织形成的条件 条件 高等植物几乎所有的器官和组织 2,4-D、NAA、IAA、KT、和6-BA 外植体 外源激素 愈伤组织培养 愈伤组织的形成过程 外植体细胞在外源激素的诱导下，经过脱分化形成愈伤组织其过程一般可分为 诱导期 分化期 分裂期 愈伤组织培养 愈伤组织形成过程 Step1 induction(诱导期) 细胞准备进行分裂的时期，是愈伤组织形成的起点 诱导期细胞的特点： 1、呼吸作用加强，耗氧量明显增加； 2、核酸的合成代谢增加并大多形成多聚核糖体； 3、RNA和蛋白质的量迅速增加； 4、酶活性增强； 愈伤组织形成过程 Step2 cell division(分裂期) 外植体细胞经诱导脱分化、脱分化，不断分裂增生子细胞的过程 愈伤组织形成过程 分裂期细胞的特点： 愈伤组织形成过程 1、细胞数量变多，体积变小； 2、细胞核和核仁增加到最大值； 3、RNA含量最高时，细胞分裂进入高峰期； 4、细胞分裂快，结构疏松，缺少组织结构，维持其不分化的状态； Step3 differentiation(分化期) 愈伤组织形成过程 愈伤组织细胞停止分裂，细胞内发生一系列形态生理上的变化形成一些不同形态和功能的细胞的时期。 分化期细胞的特点： 1、酶的活性加强，累积淀粉，RNA和组蛋白合成速度加快； 2、细胞形态大小保持相对稳定，体积不再减小，成为愈伤组织的生长中心； 愈伤组织形成过程 愈伤组织形成过程 愈伤组织的分化和形态发生 先根后芽 先芽后根 器官发生型 体细胞胚发生型 直接分化成胚 先愈伤化再形成胚 无芽的根或无根的芽 根芽同步 愈伤组织培养的影响因素 调控因素 外植体 培养基 植物生长调节剂 培养环境条件 愈伤组织培养的影响因素 外植体 遗传 种类 部位 愈伤组织培养的影响因素 培养基 无机盐浓度较高的MS等培养基 液体培养基 适当的糖浓度和激素 愈伤组织培养的影响因素 植物生长调节剂 常用生长素 2,4-D、IAA、NAA（0.01~10mg/L） 常用细胞分裂素 KT、ZT、6-BA（0.1~10mg/L） 影响茎芽分化 KT、 6-BA 影响不定根发生 NAA、IBA、IAA 、2,4-D 愈伤组织发生 愈伤组织形态发生 愈伤组织培养的影响因素 光照 培养环境条件 温度 愈伤组织培养 5.3 其它组织培养 植物薄层组织培养 髓组织培养 韧皮组织培养 类型 愈伤组织培养 韧皮组织培养