噬菌体裂解液的制备和菌种的保藏、噬菌体效价的测定、细菌转导测定、凝聚反应、沉淀反应.docxVIP

微生物学实验 实验名称 噬菌体裂解液的制备和菌种保藏 噬菌体效价的测定、细菌转导的测定 凝聚反应、沉淀反应 姓名 学号 系别 班级 实验日期 同组姓名 [实验原理及摘要] 1、噬菌体效价的测定 溶原性细菌经紫外线照射诱导后，使原噬菌体从细菌染色体上脱离而进入裂解周期，在宿主菌细胞内进行复制和组装，形成大量完整的噬菌体粒子。细菌被裂解，释放出游离的噬菌体粒子，通过离心，获得噬菌体裂解液。噬菌体的效价是指1mL噬菌体裂解液中所含噬菌体的数量在含有敏感宿主菌的琼脂平板上，噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑，根据噬菌斑形成单位（plague-for ming units, pfu）进行噬菌体效价的测定，一般用双层琼脂平板法测定。 2、细菌转导的测定 转导可以分为两种类型，即普遍性转导和局限性转导。本实验为局限性转导，以双重溶原性细菌E. coli K12 F(λ)gal-为供体，经紫外线（UV）诱导，在噬菌体裂解液中将含有两种类型的噬菌体（λ和λdg）。λdg是缺陷噬菌体，其基因组上带有宿主菌的发酵半乳糖的基因(gal)，当缺陷型噬菌体λdg再次侵染敏感菌大肠杆菌K12 S时，会将发酵半乳糖的基因转移到S菌，使S菌获得基因gal，从而使S菌获得发酵半乳糖的能力。利用转导子在EMB培养基上发酵半乳糖的特征进行转导频率的计算和分析。 3、凝聚反应 凝集反应是指颗粒