生物药剂与药物动力学.doc

实验一 扑热息痛的血药浓度测定 实验目的 通过本实验，初步掌握扑热息痛的血药浓度测定方法及有关参数的计算。 实验原理 扑热息痛与亚硝酸发生亲电取代反应，生成2-亚硝基-4-乙酰氨基苯酚，用氨基磺酸铵除去过量的亚硝酸，在碱性条件下，2-亚硝基-4-乙酰基苯酚于430nm波长处有最大吸收。 实验内容 标准曲线 精密称取扑热息痛100mg，以95%乙醇3ml溶解后加适量水，转移于100ml容量瓶中，加水至刻度，充分摇匀，得扑热息痛贮备液（1mg/ml），精密吸取该贮备液2.5ml准确稀释至10ml，得250μg/ml的标准液。 分别精密吸取250μg/ml的标准液0.15、0.3、0.45、0.6、0.75、0.9ml于离心管中，分别加水使成2ml，各加家兔血浆1.5ml，混匀，再加入2ml 10%三氯醋酸，充分混合，离心20分钟（3000rpm）。吸取上清液4ml于25ml带塞刻度试管中，分别加入6mol/L的盐酸溶液1ml，20% NaNO2溶液1ml，摇匀，放置5分钟，使反应完全。缓缓加入2ml 15%氨基磺酸铵溶液，振摇至无气泡产生，流水冷却，加入2.5ml 20%NaOH摇匀，用2cm比色杯于430nm波长处测定吸收度。用蒸馏水2ml代替标准液按同法处理，作空白对照。以吸收度对药物浓度进行回归，计算回归方程。 标准液(ml) 0.15 0.30 0.45 0.6 0.75 0.9 浓度（μg/ml） 25 50 75 100 125 150 A ā 标准曲线（回归方程）： 样品测定 取家兔5只（雌兔不得怀孕），每只体重2.5～3kg，给药前先从耳静脉取血3ml留作对照。然后按200mg/kg（体重）的剂量，肌注给药（给药前禁食12小时）。给药后按第3、5、10、15、25、30、40、60、100、140、180分钟，定时从兔耳静脉取血3ml，用预干燥并带有适量肝素钠的离心管集血，轻轻摇匀，离心10分钟（3000rpm），吸取血浆于干燥试管中，置冰箱中保存备用。 取出无药血浆与各时刻的含药血浆，室温解冻后进行测定： 吸取1.5ml血浆，置刻度离心管中，加水2ml，混匀，以下操作同标准曲线项下“加入2ml 10% 三氯醋酸，充分混合”起，依法测定吸收度，代入标准曲线，计算出该时刻的血药浓度，以无药血浆按同法处理作对照。 结果记录 兔子体重： 给药剂量： 测定记录： 编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 t(min) 3 5 10 15 25 30 40 60 100 140 160 A ā C（μg/ml） lgC t(min) C(μg/ml) 尾段直线相外推线浓度的对数（lgC外推） 外推线浓度（C外推） 残数浓度（μg/ml） C残 =C外推-C 残数浓度的对数lgC残 尾段直线相斜率= K= 残数斜率= ka= 数据处理 以血药浓度（μg/ml）为纵坐标，时间为横坐标，作吸收曲线图（血药浓度—时间曲线）。 以血药浓度（μg/ml）的对数对时间作血药浓度—时间的半对数图，从图中求出消除速度常数K，再用残数法求出吸收速度常数ka。 提取参数（t1/2吸收、t1/2消除、tp、Cp） 吸收半衰期： t1/2吸收=0.693/ ka 消除半衰期： t1/2消除=0.693/K 血药浓度—时间曲线下的总面积（AUC0→∞） 达峰时（tp） ①根据ka及K求出达峰时tp tp =（lnka - lnK）/（ka - K）=2.303×（lgka - lgK）/（ka - K） ②抛物线拟合法 用抛物线C=p+Qt+Rt2的峰段代替药时曲线的峰段，选取实验数据中最大浓度C (i)左右三点，[ ti-1，C（i-1）]、[ ti，Ci ]、[ ti+1，C(i+1)]代入，则有： C（i-1）= P+Q·ti-1 + R·t2i-1 Ci = P + Q·ti, + R·t2 i C(i+1) = P+ Q·ti+1+R·t2 i +1 解上述方程组，求得P、Q、R的值 抛物线的峰点横坐标（峰时）为tp = - Q/2R 峰浓度Cp Cp = A (e-Ktp― e-katp) A—截距（可以从lgC～t图中求得） 实验结果： 实验二 在体小肠吸收实验 【实验目的】 1. 掌握大鼠在体肠管泵循环法吸收的实