生理实验报告蟾蜍骨骼肌生理.docx

人体解剖及动物生理学实验报告 实 验　名　称蟾蜍骨骼肌生理姓名学号系别组别同组姓名实验室温度实验日期2015年5月7日 实验题目 蟾蜍骨骼肌生理 A蟾蜍腓肠肌刺激强度与骨骼肌收缩反应的关系 B蟾蜍骨骼肌单个肌肉收缩分析（潜伏期、收缩期和舒张期的确定） C蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系 实验目的 确定蟾蜍骨骼肌收缩的 （1）阈水平和最大收缩以及刺激强度与肌肉收缩之间的关系曲线 （2）收缩的三个时期：潜伏期、缩短期、舒张期 （3）刺激频度与肌肉收缩的关系 实验方法 1、蟾蜍坐骨神经-骨骼肌标本的制作及电路连接 双毁髓处死蟾蜍后，剥去皮肤，暴露腰骶丛神经，游离大腿肌肉之间的做个神经及小腿的腓肠肌，注意不要将胫神经与腓神经分离。神经端结扎后，剪去无关分支后游离至膝关节处；肌肉端结扎在肌腱上，将腓神经也一起结扎，结扎线留长。保留膝关节，剪去腿骨，将标本离体。注意保持神经肌肉湿润。 用大头钉将标本的膝关节固定于标本盒R2和R3两记录电极之间的石蜡凹槽内，保证神经、肌肉与电极充分接触。神经中枢端接触刺激电极S1和S2，肌肉接触记录电极R3和R4，之间接触接地电极。 肌肉的结扎线从标本盒中穿出，连接张力换能器。注意连线尽量短，以减小阻力。在实验过程中，注意标本的休息：将神经搭在肌肉上，用浸湿了任氏液的棉花覆盖神经肌肉，保持湿润。但标本盒内避免有过多的液体，防止短路。 换能器插头接RM6240通道1。刺激输出线两夹子分别连接标本盒的刺激电极S1和S2，插头接刺激输出插口。如果需要记录肌肉的动作电位，则在肌肉所搭置的记录电极上连接输入导线，注意接地，插头接通道2。 2、蟾蜍骨骼肌生理各项数据测定 A蟾蜍腓肠肌刺激强度和骨骼肌收缩反应的关系 打开信号采集软件，从“实验”菜单中选取“刺激强度对骨骼肌收缩的影响”，出现软件自动设置界面，各项参数已设置好，但需要将“采集频率”修改成“20kHz”，扫描速度仍然是“1.0s/div”。界面的采集通道默认为RM6240B面板上的通道1.刺激模式自动设置为强度递增刺激，起始强度为0.02V（可根据标本特性灵活选择） 检查装置连接正确后，点击“开始记录”，屏幕下出现扫描线，软件处于记录状态。（主义不要点击“开始示波”，在示波状态下，文件不能保存。）扫描线如偏离零点较远，需要调零：将换能器与标本盒的棉线放松，旋转换能器的调零钮，使基线恢复零点。 将换能器连接的棉线拉直，如果基线偏移零位（肌肉被牵拉的程度会影响基线位置），不必去管（不必重新调零，测量时，将偏移量减去即可）。点击“开始刺激”，刺激器按一定时间间隔自动输出单个刺激方波，后一次比前一次强度递增。将“刺激标注”激活，显示出每次发放的刺激的强度。屏幕上应出现一系列由刺激触发的肌肉收缩曲线，同时可以观察到标本盒中肌肉的收缩。注意文件的保存（不要移动标本盒与换能器的位置，即肌肉被牵拉的程度保持固定。此要求也适用于ⅡB和ⅡC。） 当收缩幅度不再变化时，停止刺激，停止记录。 应用测量工具，确定收缩的阈水平和最大收缩。并确定最大收缩所对应的最小刺激强度（即最适刺激强度）。记录下收缩幅度，刺激和放大器的参数设置。（注意在测量时。需将波形适当展开，确保测量数据更准确。） 绘制刺激强度与肌肉收缩幅度之间的关系曲线。 B单个肌肉收缩分析（确定潜伏期、缩短期、舒张期） 将ⅡA实验得到的最大刺激强度对应的收缩曲线展开，应用测量工具确定收缩的三个时期：潜伏期、缩短期、舒张期。 至少测量三次。计算几次重复测量得到的三个时期的平均值和标准差。 C蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系 打开信号采集软件，关闭通道3和4，保留通道1和2，分别对应肌肉收缩信号和肌肉动作电位信号。示波状态下修改参数设置：采集频率20kHz；通道1：通道模式为张力，扫描速度400ms/div，灵敏度7.5g（可根据收缩幅度合理选择），放大器时间常数设为直流，滤波频率100Hz；通道2：通道模式为生物电，扫描速度400ms/div，灵活度2mv，放大器时间常数0.001s，滤波频率1kHz。刺激模式为串单单刺激，波宽1ms，延时20ms，选择一定的刺激脉冲个数（10-60个，避免让肌肉受到过多刺激）和刺激强度（阈上刺激强度即可，不必达到最大刺激强度，避免收缩幅度过大，超出换能器量程）。 点击“开始记录”，软件进入记录状态。 记录过程中逐渐提高刺激频率，在一定的刺激频率下，点击“开始刺激”，刺激器按此频率连续发放设定的刺激脉冲个数，肌肉出现相应的收缩。 观察肌肉收缩的总和现象，确定肌肉收缩的最小融合频率，观察肌肉动作电位与收缩的关系。 观察不同频率引起肌肉收缩的幅度变化。 四、实验结果 A蟾蜍腓肠肌刺激强度和骨骼肌收缩反应的关系 图1. 蟾蜍腓肠肌刺激