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DNA重组技术的基本工具高中课件
1.1 DNA重组技术的基本工具 资料分析 此转基因实验实现了哪种生物的哪些性状在另外哪种生物中表达? 性状的表达与我们从前学过的什么过程有关? 要实现药物基因在烟草中的表达,要提前做哪些关键工作? DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具(“分子手术刀”) ——限制性内切酶 DNA片段的连接工具(“分子缝合针”) ——DNA连接酶 基因转移工具(“分子运输车”) ——基因进入受体细胞的载体 思考 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例? 现今存在的生物为什么没有在长期的进化过程中被外源DNA的入侵而灭绝,仍能保持一种稳定状态? 怎样才能使外来的DNA失效从而保护自身? 思考 从哪里可以找到这种切割外来的DNA而对自身不切割的物质? 科学家是怎样找到这种酶的? 这种酶具有什么作用? 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 阅读思考 限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否可以不加选择? 基因进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入细胞的工具就是载体。 基因进入受体细胞的载体 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样? 作为载体没有切割位点将怎样? 目的基因是否进入受体细胞,你如何察觉? 如果载体对受体细胞有害将怎样?如果不能分离会怎样? 作为载体的必要条件 能自我复制 有切割位点 能与目的基因结合 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达; 有遗传标记基因 对受体细胞无害、容易分离 比较容易得到 练习 在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用( ) 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 基因工程常用的受体细胞有( ) (1)大肠杆菌 (2)枯草杆菌 (3)支原体 (4)动植物细胞 A. (3)(4) B. (1)(2)(4) C. (2)(3)(4) D. (1)(2)(3) * / 位于费城托马斯·杰斐逊大学的希拉里和她的同事成功地将人体狂犬病抗体的DNA译码移入烟草作物中。 转基因烟草作物可以产生一种人体蛋白质,而这种物质能抗击致命性的狂犬病病毒。 基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具: 限制性核酸内切酶的作用: 能识别特定核苷酸序列; 从特定部位的两个核苷酸之间切开。 内切酶切割DNA厚形成的 末端——黏性末端、平末端是如何形成的? 重播 DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端,能够通过互补进行配对。 基因的针线──DNA连接酶 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接,你觉得可以用什么酶? DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同和不同点? 3、基因的运输工具——运载体 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在,将来可用含青霉素的培养基鉴别。 *
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