通痹汤治疗痛风病药效学研究与其含药血清的免疫调节作用.pdfVIP

6．通痹汤含药血清免疫调节作用研究。 (1)含药血清对固有性免疫的作用。以大鼠腹腔巨噬细胞为研究对 象，观察药物对其功能的影响：免疫酶技术检测含药血清对sTNF诱导的 巨噬细胞呼吸爆发现象的影响；实时荧光定量PCR检测含药血清对sTNF mRNA表达的影响；激光共聚 诱导巨噬细胞炎性细胞因子IL-Ip、TNF-cx 小鼠碳粒廓清法检测含药血清对巨噬细胞吞噬功能的影响； (2)含药血清对适应性体液免疫功能的作用：美洲商陆诱导的B淋 巴细胞增殖实验、sRBC诱导的小鼠抗体应答实验； (3)含药血清对适应性细胞免疫功能的作用：刀豆蛋白A诱导的T 淋巴细胞增殖实验、DNCB-丙酮溶液诱导的迟发型超敏反应实验； 检测不同时相关节滑膜囊细胞因子的种类和含量。 结果 1．理论研究结果：脾虚不运、湿浊为患是痛风病的重要病机。 2．通痹汤镇痛作用的实验结果： 急性毒性实验确定用药安全剂量为：小鼠用药量：高剂量组259／kg， 中剂量组为129，低剂量组为69。大鼠用量约为小鼠剂量×0．7，即为高 小鼠腹痛的影响结果显示治疗组低、中、高剂量组均可见扭体次数减少， 与阴性对照组比较具明显差异(PO．001)；热板法检测药物对小鼠热致 疼痛作用的影响结果显示测得治疗组痛阈平均值与阴性对照组相比显著 提高(PO．01)；甲醛测痛实验结果显示通痹汤对甲醛致痛作用第一时相 3．通痹汤抗炎作用的实验结果： 二甲苯致小鼠耳肿胀实验结果显示各组与空白组比较均有显著性差 结果显示致炎后1h，药物大剂量组；致炎后2h药物中、大剂量组；致炎 后4h、6h药物大、中、小剂量组抑制率均大于30％，其中大剂量组在4 小时左右抑制能力最强为50．31％；炎症组织渗出液内炎症介质含量测定 结果显示治疗组组织渗出液内组织胺含量显著降低；药物高剂量组前列腺 药组均能降低依文思兰的吸光度(OD值)；大鼠棉球植入实验结果显示， 通痹汤中高剂量组可明显抑制大鼠肉芽组织增生(PO．001)。 4．通痹汤影响嘌呤代谢的实验结果： 鸡痛风症动物模型血尿酸水平的影响结果显示治疗组血尿酸值均显 著降低，与治疗前相比均有显著性差异(PO．05)，治疗后通痹汤高、中、 低剂量组粪便中尿酸排泄量均显著增高，与治疗前相比均具显著性差异； 对鸡痛风动物模型血清XOD活性的影响实验结果显示，各剂量组XOD活性 降低，其中中、高剂量组与模型组相比有显著性差异(PO．05)。低剂量组 无显著差异。 5．通痹汤对急性痛风性关节炎作用的实验结果： 药物对大鼠尿酸钠诱发急性炎关节肿胀的影响实验结果显示在注射 物组最高抑制率达68．6％(高剂量组，24小时)所用药物两剂量组之间的 疗效无显著性差异。检测滑膜炎性细胞因子mRNA表达结果显示秋水仙碱 B 组(阳性对照组)、治疗组IL-1RT-PCR产物量明显低于生理盐水组。而 通过密度扫描进行相对定量，证实治疗组的抑制效率为50％；治疗组I和 生理盐水组明显减少。通过密度扫描进行相对定量，证实治疗组的抑制率 为30％o 6．通痹汤含药血清免疫调节作用实验结果： (1)含药血清对固有性免疫的作用： 结果显示10％浓度含药血清可明显抑制sTNF诱导巨噬细胞的呼吸爆 发，而20％含药血清的抑制作用最强；检测含药血清对sTNF诱导巨噬细 NF一1(B核转位现象，但不同剂量含药血清组间未见差异；单核吞噬细胞吞 噬功能测定结果显示含药血清低剂量组和中药水剂低剂量组K值变化与 生理盐水对照组比较没有统计学意义，而含药血清高剂量组和中药水剂高 剂量组K值增加(P0．05)。 (2)含药血清对适应性体液免疫功能的作用： 淋巴细胞增殖实验结果显示含药血清对PWM诱导的B淋巴细胞增殖指 数增高，提示有细胞增殖，但无统计学差异。(pO．05)；测定含药血清对 小鼠sRBC初次应答的水平的影响，将给药组与对照组平均HC∞值进行t 检验，结果显示，药物中、高剂量组HC。。增高(卵O．05)。 (3)含药血清对适应性细胞免疫功能的作用： 淋巴细胞增殖实验结果可见不同浓度含药血清可剂量依赖性抑制T 量依赖性的抑制作用。 (4)含药血清对CD4+T细胞类型(Thl／Th2)的影响： ELESA检测不同时相细胞因子