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微生物活菌平板计数方法和技术 微生物肥料和食用菌菌种质检中心 曹凤明 微生物计数方法种类 直接计数法 核酸计数法 活菌计数法（培养法） MPN（Most-Probable-Number ）最大可能数法 混菌法 平板技术法 直接计数法 1. 显微镜直接计数 比浊法 3. 电子计数器计数法 1. 显微镜直接计数 显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液 血球计数板：菌体较大的酵母菌或霉菌孢子 细菌计数板：一般细菌 用途：快速了解发酵液的菌数。常用于生产线上生产过程控制。 缺点：不易区分颗粒、死菌体和杂菌，计数与真实菌数有很大差异。不能作为正规计数方法。 核酸计数法 每一种生物都有一套自己独有的遗传物质，脱氧核糖核酸和核糖核酸，即DNA和RNA。随着核酸分析技术的发展，已经能够利用遗传物质对生物进行定性和定量的测定，而且更为灵敏、迅速、专一性强。 常用的方法：荧光定量PCR 此法操作精细繁琐，药品昂贵，而且经常受到死菌体的干扰。暂时不能成为微生物肥料活菌计数的常用方法， 活菌计数法（培养法） MPN（Most-Probable-Number ）最大可能数法（主要用于光合细菌和（粪）大肠菌群的测定） 混菌法（适用于兼性厌氧微生物的测定） 取1.0mL不同稀释度菌悬液于灭菌平皿内，将冷却至50℃左右的15~20mL培养基倒入培养皿内轻