第八章 植物的胚胎培养.pptVIP

8.1.5 影响离体幼胚培养的其它因素 幼胚的发育时期 胚柄的作用 在培养中胚柄的存在对于幼胚的存活是一个关键因素。 培养基的渗透压 在幼龄胚培养中，培养基的渗透压是控制胚生长的重要因素。 母体植株上的幼龄胚是在具有较高渗透压的液体胚乳之中生长，即幼胚被一种高渗液体包围着。 郭仲琛（1978）研究表明，向日葵不同发育时期的胚对蔗糖的要求有较大的差异：幼胚长度1～1.1 mm，要求蔗糖浓度17.5%，成熟胚要求蔗糖浓度只有0.5%。 （2）子房培养的一般方法 材料制备： 未传粉子房培养时 ，选用开花前1～5d的花蕾。 培养基： 子房培养常用的培养基有MS、Whiter、Nitsch等。碳源主要是蔗糖和葡萄糖，浓度为2～5%。B族维生素、椰子乳和其它一些天然提取物对子房发育成果实或种子都有良好的促进作用。培养基中附加一定的赤霉素，生长素和细胞分裂素，可使离体子房发育的果实增大。 培养： 子房培养一般温度为20～25℃。对光照要求不严，大多数植物子房培养早期在黑暗，弱光照条件下生长良好。 （3）附属花器对子房培养的作用 花被在果实和胚胎发育中成起着重要的作用。 双子叶植物各种花的萼片，对培养子房的生长显示了有利的影响 。 柑橘上珠心苗的作用 与营养系相比,实生群体常具有变异普遍、变异性状多而且变异幅度大的特点。 对多胚性的柑橘进行实生选种,有可能获得:①利用有性系变异选育出优良的自然杂种,例如温州蜜柑、葡萄柚、日本夏橙等都源出于自然杂种;②利用珠心系中发生的变异选育出新的优良品种、品系,例如四川的锦橙、先锋橙;③利用珠心胚实生苗的生理复壮作用选育出该品种的新生系,例如美国从华盛顿脐橙、伏令夏橙、柠檬中选育出的新生系均比老系表现树势旺盛、丰产稳产、适应性增强,而又保持原品种的优良品质。 胚乳在被子植物中是双受精的产物，由极核和雄配子结合成的三倍体组织。 而裸子植物胚乳在受精前形成，为单倍体。 仅40多种植物进行胚乳培养研究，20种获得再生植株，如猕猴桃等。多存在混倍现象。 变异的广泛性： 大多数被子植物胚乳愈伤组织的细胞核型具有广泛的变异，包括大量多倍体、亚多倍体和非整倍体，同一植株往往是不同倍性细胞的嵌合体。 也有不少植物，如罗氏核实木、檀香、核桃、橙和柚等，其胚乳细胞在培养中表现了倍性的相对稳定性，且这类胚乳细胞往往也能长期保持器官分化能力。 （1）胚乳的类型： 核型胚乳在游离核发育时期常常发生无丝分裂、核融合以及异常有丝分裂等现象，因此由核型胚乳产生的愈伤组织也必然是多种倍性细胞及非整倍体细胞的嵌合体。 （2）胚乳愈伤组织发生的部位。 （3）培养基中外源激素的种类和水平的影响。 （4）继代培养时间长短的影响。 （1）获得三倍体植物 与二倍体植物相比，三倍体物种在植物改良上具有特殊的意义。三倍体物种不仅具有营养体生长优势，而且还可以产生无籽果实，因此，一些重要的经济植物（如苹果、香蕉、桑树、甜菜、西瓜等）的三倍体已在生产上应用。 1472?×?1017?-?该品种为三倍体无核欧美杂交种。 （2）创造并获得染色体数目变异的遗传材料 研究表明，被子植物胚乳再生植株，染色体数目变异很大，除三倍体外，还有其它多倍体和非整倍体植株。例如苹果、桃、大麦、小黑麦等，其胚乳再生植株变异广泛。 通过胚乳培养，研究胚和胚乳之间的关系，进一步阐明胚和胚乳在自然情况下的相互作用，对胚胎学的研究将会起到积极作用。 胚乳培养也为研究胚乳组织中一些特有的天然产物的生物合成和代谢提供了一个理想的实验系统。 * 兰花、天麻等一些寄生植物或附生植物，有的胚只有6～7个细胞，在培养基上培养，胚就能生长发育成正常的植株。 胚培养对于一些具有珠心胚的植物，如柑桔（Citrus）、芒果（Mangifera indica）、紫萼等，具有特殊的意义。 在柑桔杂交育种中一个问题是杂交往往得不到杂种胚，由于珠心胚的生长把合子胚挤到旁边去。 离体胚培养还可用于许多重大理论问题的研究，如胚胎发育过程，影响胚发育的各种因素，胚乳作用以及与胚发育有关的代谢和生理变化等。 (7) 脱分化与再分化培养 以幼胚或成熟胚为外植体诱导愈伤组织，建立胚性无性系，不仅可以应用于研究体细胞胚胎发生、分离原生质体，还可应用于植物体细胞遗传饰变和转基因技术的研究等。 植 物 胚 珠 结 构 侧膜胎座（右） 中轴胎座 葫芦科的下位子房 8.2.1 胚珠培养: 概念：在人工控制的条件下，对胚珠进行离体培养使其生长发育形成幼苗的技术。 1980年成功培养了未授粉的非洲菊、烟草的胚珠，获得了单倍体植株。 子房 多个胚珠 由于幼胚分离难度大，而胚珠分离