基因工程高三复习用.pptVIP

第35讲基因工程 第一章：基因工程 思考 二、操作的工具 （三）基因操作的基本步骤 【将目的基因导入动物细胞】 方法：显微注射法 程序： 基因操作的基本步骤 （四）基因工程的成果与发展前景 1、基因工程与医药卫生 3、基因工程与环境保护 基因工程的弊端 完成资料书212页 《基础训练》 基因定点诱变技术的示意图 真核细胞的 基因结构 编码区 非编码区 外显子：能编码蛋白质的序列 内含子：不能编码蛋白质的序列 ：有调控作用的核苷酸序列， 包括位于编码区上游的RNA 聚合酶结合位点等。 非编码序列： 包括非编码区和内含子 都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的 相同点 编码区是间隔的、_____的 编码区是 _____的 不同点 真核细胞 原核细胞 原核细胞与真核细胞的基因结构比较 思考 编码相同数目氨基酸的蛋白质，原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗？ 连续 不连续 编码区 非编码 3、将目的基因导入受体细胞（转化） 导入 扩增 　要让目的基因表达，必须将它导入受体细胞并进行扩增。 　为使重组的DNA分子更容易进入受体细胞，通常还要用一些物质对受体细胞进行处理，使受体细胞具有更大的通透性。 （一）转化： （二）方法 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 ——感受态细胞 目的基因进入_________内，并且在 受体细胞内维持_____和_____的过程 受体细胞 稳定 表达 【将目的基因导入植物细胞的方法】 （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点： 易感染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力 目的基因表达载体提纯 取卵（受精卵） 显微注射 受精卵 新性状动物 【将目的基因导入微生物细胞】 原核生物特点：繁殖快、单细胞、 遗传物质少 方法： 用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 检测— 鉴定— ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 方法—— 方法—— 方法—— DNA分子杂交 基因探针与mRNA杂交 抗原抗体杂交 4、目的基因的检测和表达 基因探针 基因探针就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列。它包括整个基因，或基因的一部分；可以是DNA本身，也可以是由之转录而来的RNA。 归纳步骤 【检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因】 ①首先取出转基因生物的基因组DNA； ②用含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记,以此做探针； ③使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带,表明染色体已插入染色体DNA中。 （1）方法: DNA分子杂交 （2）过程: 【检测目的基因是否转录出了mRNA】 【检测目的基因是否翻译成蛋白质】 ①方法: 基因探针与mRNA杂交 方法： 抗原抗体杂交 ②过程: 用上述探针和转基因生物的mRNA杂交,若出现杂交带,表明目的基因转录出了mRNA 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 鉴定（个体生物学水平） 1、基因工程与医药卫生 2、基因工程与农牧业、食品工业 3、基因工程与环境保护 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 （1）基因工程药品的生产 微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。如利用大肠杆菌生产胰岛素、干扰素、白细胞介素—2等。既增加产量，又降低成本。 胰岛素是治疗糖尿病的特效药。一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，每100kg胰腺只能提取4~5g胰岛素。用该方法生产的胰岛素产量低，价格昂贵，远不能满足社会需要。1979年，科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组，并在大肠杆菌内实现了表达。1982年，美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场，售价降低了30%~50%。 基因工程药品 —— 胰岛素 治疗侏儒症的唯一方法，是向人体注射生长激素。而生长激素的获得很困难。以前，要获得生长激素，需解剖尸体，从大脑的底部摘取垂体，并从中提取生长激素。 现可利用基因工程方法，将人的生长激素基因导入大肠杆菌中，使其生产生长激素。人们从 450 L大肠杆菌培养液中提取的生长激素，相当于6万具尸体的全部产量。 基因工程药品