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第一章 绪论 本章主要内容: 第一节 植物组织培养的含义、类型与特点 第二节 植物组织培养的基本理论 第三节 植物组织培养的发展与应用 教学目标: 掌握组织培养的概念和类型及理论依据;? 掌握组织培养的特点; 了解组织培养发展史及在专业学习中的地位,树立学习本课程的信心; 初步掌握组织培养在实践上的应用。 重点难点:组织培养的概念、类型及理论依据;组织培养在社会实践中的应用。 §1-1 植物组织培养的含义、类型与特点 一、植物组织培养(tissue culture)的含义 在无菌条件下,将离体植物的器官、组织、细胞或原生质体在人工配制的培养基上,并给予适当的培养条件使其长成完整植株或生产次生代谢物质 的过程和技术。 也称离体培养(Invitro culture) 。 二、此定义内涵: 1、无菌条件:外植体、培养基、培养容器、接种工具、操作环境、培养环境等。 2、外植体:从健康植株的特定部位或组织,如根、茎、叶、花、果实、胚珠、花药和花粉等,选择用于组织培养的起始材料,称之为外植体。包括营养器官、生殖器官、组织、细胞等。 3、培养基:是植物组织培养的重要基质, 它提供植物生长所需的营养物质。人工配制,成分确定。 4、组培的理论基础:植物细胞的全能性。 5、激素 :调控培养物的状态和发育方向,实现不同的实验目的。 6、封闭培养 :通过封口材料实现气体交换。 7、培养条件:人为控制。 三、植物组织培养的四要素 (1)无菌 (2)培养材料: ①器官:根、茎、叶、花、果实 ②组织:花药组织、胚乳、皮层等 ③细胞:体细胞(2n)、生殖细胞(n) ④原生质体 (3)培养基 (4)培养条件:温度、光照、湿度 等 四、与组培有关的术语 1、植物细胞全能性:植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性,在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。 原理:植物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因,从理论上讲,植物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 2、外植体:从健康植株的特定部位或组织,如根、茎、叶、花、果实、胚珠、花药和花粉等,选择用于组织培养的起始材料,称之为外植体。供离体培养用的植物器官统称外植体。 3、愈伤组织:在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 4、分化:具有分裂能力的分生细胞停止分裂,形成具有各种特殊构造和机能的细胞组织和器官的发育过程。 5、脱分化(去分化):已经分化的细胞在一定因素的作用下,改变原来的发展方向,重新恢复分裂能力的过程。 6、再分化:愈伤组织在合适的条件下,重新分化形成具有各种特殊功能或结构的器官和组织的过程。 7、胚状体:非合子细胞形成的胚状结构,如兰花的原球茎。 8、胚胎发生:培养物通过与正常的受精卵发育相似方式形成胚状体的过程(经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期)。 五、植物组织培养的类型(一) 1、植株培养:对完整植株材料的无菌培养,如幼苗及较大植株的培养。 2、胚胎培养:从果实或子房中分离出未成熟或成熟的胚的无菌培养。 3、器官培养:对植物根、茎、叶、花、果实的无菌培养。(常用) 4、组织培养:对植物体所有组织如分生组织、胚乳组织、薄壁组织、花药组织、愈伤组织的培养。 5、细胞培养:对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞、花粉单细胞或很小的细胞团的无菌培养,以获得无性繁殖系。 6、原生质体培养:对用酶、物理等方法除去植物细胞壁的、裸露的、有活性的原生质体团的无菌培养。 植物组织培养的类型(二) 初代培养和继代培养 植物组织培养的类型(三) 液体培养:在培养基中不加入任何的凝固剂使培养基呈流体状态的培养,由于液体中氧气含量较少,常用振动培养的方法以确保氧气的供给。 往复式摇床或旋转式摇床进行培养,速度一般为50-200r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。 缺点:不能较好地固定培养物, 优点:营养成分得到充分利用,产生的有害物质能及时清除 液体培养:在培养基中不加入任何的凝固剂使培养基呈流体状态的培养,由于液体中氧气含量较少,常用振动培养的方法以确保氧气的供给。 往复式摇床或旋转式摇床进行培养,速度一般为50-200r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。 缺点:不能较好地固定培养物, 优点:营养成分得到充分利用,产生的有害物质能及时清除 六、植物组织培养的技术特点(优越性) 1、试验材料来源单一,无性系遗传特性一致; 2、成本低,效率高; 3、环境条件可控,误差小; 4、生长快,周期短,可
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