细胞与原生质体培养.pptx

10 植物细胞培养;10.1 细胞培养的概念及种类;10.1.2 种类;10.2 细胞的悬浮培养;;（3）特点：;600～800 mg生长旺盛的愈伤组织;;由完整植物器官中分离单细胞; 研磨法 分离植物 单细胞程序;植物组织进行常规消毒;（5）悬浮细胞培养方法;10.3 单细胞培养;①由完整的植物器官分离单细胞---- 叶片是分离单细胞的最好材料 --机械法 --酶解法;;第二种方法：叶片研碎、离心;酶解法:;②由培养组织分离单细胞;;（3）植物单细胞培养方法;②平板培养：将悬浮培养的细胞接种到一薄层固体培养基中进行的培养称之为平板培养;10.4 植物细胞培养的应用;利用植物细胞大规模培养技术已能生产许多重要的药物和保健品。 如长春花碱、紫杉醇、地高辛、东莨菪碱、山莨菪碱、奎宁等重要药物的细胞培养已进入了中试阶段或已进入了规模化生产，日本的紫草素、韩国的人参皂苷、德国的咪叠丁香、美国的紫杉醇、中国的白藜芦醇等已进入了产业化的生产和商品化阶段。 ;10.4.2 植物细胞的生物转化;方法： 第一种给细胞提供一般情况下植物所不具备的底物化合物，如人工合成化合物、中间产物类似物，或其它物种的植物产物，以期得到自然中所不存在的化合物； 第二种方法是给细胞提供天然产物的中间体（如某种化合物的前体），以期提高该种天然化合物的产量。;最成功的例子就是β-甲基毛地黄的生物转化。这一化合物是通过甲基化由毛地黄毒苷制备的。毛地黄细胞培养，将这一化合物羟基化为β-甲基异羟基毛地黄苷——强心苷。这是经过12β羟基化作用而形成的，这种化合物被广泛的应用于医学，而至今这一化合物基本上还是由异羟基毛地黄毒苷的化学甲基化法来生产的。 ;10.4.3 植物细胞变异体的选择 及人工种子的生产;10.4.4 重要的实验研究系统;11 植物原生质体培养;11.1 植物原生质体培养的概念;Fig 1? Plant regeneration from protoplasts of K. blossfeldiana（长寿花） a .Axenic plant used as source of leaf explants; b. leaf explants preculture; c. leaf tissue before and D. after enzymatic digestion; e .protoplast purification; f. first cell divisions; g. protoplast-derived colonies; h. visible small calli; i. green calli; J. organogenic green calli; k .calli with shoots; l .rooted shoot; m .plant acclimatization. Bar?=?25?μm ;原生质体培养的操作实例;11.2 原生质体分离 ;机械分离法缺点;（2）酶分离法;与机械法相比，酶法分离植物原生质体有以下优点：（1）容易分离出大量的完整原生质体；（2）只需细胞质发生轻微的渗透收缩，几乎能从所有植物组织或细胞中分离出原生质体；（3）细胞不会象机械法那样破碎。;11.3 原生质体培养的应用;植物原生质体的融合;番茄+马铃薯; 培育出的“泡马豆”外型倾向于蕃茄，花叶果实具有杂种特点，遗憾的是地下部分没有长出科学家们想象中的大土豆。 ;植物体细胞杂交过程中已取得的进展：;植物细胞融合的新品种柑橙;原生质体电融合;（2）遗传转化及细胞器转移;（3）无性系变异的良好体系;（4）分离植物细胞器的理想材料;（5）基础研究的实验系统