吸光光度法()研究报告.pptVIP

§10-1吸光光度法基本原理 一、概述: 二、可见吸收光谱 2.物质结构： 物质由分子构成 固有的内能 连续变化的平动能 分子能量包括 电子运动能 量子化的 振动能 转动能 物质对光的选择性吸收与分子内量子化的 能量有关。 以双原子分子的能级图为例: 能级跃迁 3. 物质对光的选择性吸收及吸收曲线 分子对光的吸收与吸收光谱 吸收曲线的讨论： 3.紫外—可见分子吸收光谱与电子跃迁 讨论： 讨论： 三、分子吸收光谱与电子跃迁 ?⑴　σ→σ＊跃迁 ? ⑶ π→π＊跃迁 生色团与助色团 红移与蓝移 2.金属配合物的紫外—可见吸收光谱 电荷转移吸收光谱 三、光的吸收定律 朗伯—比耳定律数学表达式 2.摩尔吸光系数ε的讨论 摩尔吸光系数ε的讨论 朗伯-比尔定律的适用条件 （1） 平行单色光 应选用?max处或肩峰处测定. 3.偏离朗伯—比耳定律的原因 非单色光作为入射光引起的偏离 讨论: （2） 化学性因素 §10-2 光度分析的方法和仪器 方便、灵敏，准确度差. 常用于限界分析. 2. 光电比色法 3. 吸光光度法和分光光度计 分光光度计的主要部件 光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度, 稳定。 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm) 氙灯：紫外、可见光区均可用作光源 吸收池(比色皿)：用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池 紫外区：石英池 朗—比耳定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用；假定只有在稀溶液(c10-2mol/L)时才基本符合。 当溶液浓度c 10 －2 mol/L 时，吸光质点间可能发生缔合等相互作用，直接影响了对光的吸收。 溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。 故：朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。 例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡： CrＯ42- ＋ 2H＋ = Cr2Ｏ72- ＋ H2Ｏ 溶液中CrＯ42-、 Cr2Ｏ72-的颜色不同，吸光性质也不相同。故：此时溶液浓度、pH 对测定有重要影响。 光度分析的几种方法 1.目视比色法 观察方向 空白 c1 c2 c3 c4 通过滤光片得一窄范围的光(几十nm) 光电比色计结构示意图 通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光. 波长可调, 故选择性好, 准确度高. 分光光度计的基本组成 光源 单色器 吸收池 检测系统 显示系统 ?/nm 钨灯（热辐射光源） 400 600 800 1000 氙灯（气体放电光源） 氢灯 强度 ? A 氙灯 氢灯 钨灯 单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的 装置。 棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同. 玻璃350～3200nm, 石英185～4000 nm 入射狭缝 准直透镜 棱镜 聚焦透镜 出射狭缝 白光 红 紫 λ1 λ2 800 600 500 400 光栅衍射示意图 M1 M2 出射狭缝 光屏 透镜 平面透射光栅 波长范围宽, 色散均匀, 分辨性能好, 使用方便. 光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。 －平面透射光栅 －反射光栅（广泛使用） * * 第10章 吸光光度分析 §10-1 吸光光度法基本原理 §10-2 光度计及其基本原理 §10-3 显色反应及显色条件的选择 §10-4 吸光度测量条件的选择 §10-5 吸光光度法的应用 基于物质光化学性质而建立起来的分析方法称之为光化学分析法。 分为:光谱分析法和非光谱分析法。 光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。 在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法,主要有: 红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围2.5?1000 ?m ,主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200?400 nm（近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。