吸光光度分析研究报告.pptVIP

 (1)物质对光的选择性吸收 (2)光吸收曲线 将不同波长的单色光通过某一固定浓度的有色溶液，测量对应波长下溶液对光的吸光度，然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，即可得一曲线，称为光吸收曲线。 光吸收程度最大处的波长称为最大吸收波长,用λmax表示。 三、朗伯-比耳定律 A = Kbc 其物理意义是：在一定温度下，一束平行的单色光通过均匀的非散射的溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。 A = abc （c：g·L－1，b：cm，K用a表示，其单位为L·g－1·cm－1，a称为吸光系数 ） A =εbc （c：mol·L－1，b：cm，K用ε表示，其单位为L·mol－1·cm－1，ε称为摩尔吸光系数 ） ε越大，反应越灵敏,可测定组分的浓度也越低。一般认为ε＜104的显色反应属低灵敏度，在104～5×104时属中等灵敏度, 在6×104～105时属高灵敏度, ＞105属超高灵敏度。 显色反应一般可表示为： M + R ? MR (被测组分) (显色剂) (有色化合物) 吸光光度仪器的一般操作程序 a.选合适的波长作为入射光，接通电源预热仪器。 b.调透光率为零，即仪器零点。光路应断开，光电转换元件不应受光，显示系统显示T%=0.0，如不在“0”处，则应调节到“0”。 c.调T%=100.0 。将参比溶液置于光路，接通光路(盖上吸收池暗箱盖)，显示系统显示T%= 100.0 。2、3步应反复调整。 d.将样品溶液推入光路，读取吸光度A。溶液的吸光度应控制在0.2～0.8范围内，使测定结果有较高的准确度。而当A=0.434或T%=36.8时，测定的误差最小。过大或过小应予以调节。 e. 整理好仪器。 §10－4 吸光光度法的应用 2.工作曲线法（标准曲线法 ）适用于经常性的、大批试样的分析 以A为纵坐标，标液的浓度c为横坐标作图，得到一条通过原点的直线，称为工作曲线或标准曲线。 再在相同条件下用相同方法配制样品溶液，并测出其吸光度Ax，在工作曲线上即可查得相应的浓度cx。 注意：待测样的测定结果应在工作曲线范围内，不能延长工作曲线；工作曲线也只能在同一次测定中应用。 无机及分析化学 * 本章主要介绍可见分光光度法的基本原理、仪器的基本结构和有关应用。 第十章 吸光光度分析法 1、熟悉吸光光度法的特点； 2、掌握吸光光度法的基本原理及适用范围； 3、了解吸光光度法的分析方法以及显色反应和显色条件的选择； 4、了解吸光光度法仪器构造及测量条件的选择。 学习要求 §10－1 吸光光度法的基本原理 二、物质对光的选择性吸收 三、朗伯—比耳定律 四、偏离朗伯—比耳定律的原因 §10－3 光度分析法及其仪器 一、目视比色法 二、分光光度法及分光光度计 一、显色反应与显色剂 二、影响显色反应的因素 §10－4 吸光光度法的应用 §10－2 显色反应及其影响因素 一、吸光光度法的特点 三、吸光度测量条件的选择 吸光光度分析：利用物质对光的选择性吸收特性进行测定一种分析方法，主要适用于微量组分分析。包括可见光吸光光度法、紫外吸光光度法、红外吸收光谱法。 紫外-可见光吸光光度法简称为吸光光度法。 §10－1 吸光光度法的基本原理 1.灵敏度高 测定含量可低至10－4～10－6% ； 2.准确度好 相对误差一般为2～5% ； 3.快速简便 步骤包括将样品处理成溶液、显色、测定，所需的仪器设备均不复杂，操作简便，易于掌握 ； 4.应用广泛 一、吸光光度法的特点 光的互补色示意图 二、物质对光的选择性吸收 1.单色光、复合光、互补色光 单色光：具有同一波长的光 复合光：由不同波长的光组成的光 互补色光：适当颜色的两种单色光按一定的强度比例混合，也可以成为白光，这两种单色光被称为互补色光 KMnO4溶液的光吸收曲线 2、溶液的颜色与光的选择性吸收 思考1、符合比耳定律的有色溶液稀释时，其最大吸收峰的波长位置 A.向长波方向移动 B.向短波方向移动 C.不移动，但高峰值降低 D.不移动，但高峰值增大 √ 当一束平行的单色光照射到任何均匀的、非散射的介质(固体、液体或气体),例如溶液时，光的一部分被介质吸收，一部分透过溶液，一部分被器皿的表面反射。如果入射光的强度为Io，吸收光的强度为Ia，透过光的强度为It，反射光的强度为Ir，则： Io = Ia + It + Ir 可简化为 ：Io = Ia + It （ Ir 基本上不变 ） 透光率T 透光率倒数的对数则表示有色溶液对光的吸收程度，称为吸光度A