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荧光实时定量PCR;;;PCR;典型的PCR四阶段;实时荧光定量PCR;Real-time PCR VS PCR;1.荧光染料掺入的原理？
——荧光强度与模板的数量成正比
2.如何根据扩增曲线来进行模板的定量分析？;;荧光实时定量PCR技术的产生;两种定量化学;染料染色;PCR过程中染料的掺入：信号强度与双链DNA分子数正比;;;熔解曲线;;染料的特点;探针标记;热变性，配对;荧光共振能量转移(FRET);探针的特点;方法;;
横坐标：扩增循环数（Cycle）
纵坐标：荧光强度
每个循环延伸步骤进行一次荧光信号的收集;理想的PCR反应：
X=X0*2n
n：扩增反应的循环次数
X：第n次循环后的产物量
X0：初始模板量;
log X0 = -C+ log M
M:阈值 C(Cq/Ct)：产物到阈值的循环数
Log X0（初始模板量）与 Ct呈反比的线性关系。;;相同模板进行96次扩增，终点处产物量不恒定，
对数期 Ct值则极具重现性;2种定量目??;检测起始模板数的精确拷贝数
?标准曲线法
病毒感染的定量监测
HIV RNA，HCV RNA
;绝对定量——标准曲线;相对定量内参;双标准曲线法;1.荧光染料掺入的原理？
——荧光强度与模板的数量成正比
2.如何根据扩增曲线来进行模板的定量分析？;;双探针法;分析应用;应用领域
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