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- 2017-05-13 发布于湖北
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多克隆抗体的制备详解
半抗原性免疫原的制备 载体选择: (1)蛋白质类:常用的有人血清白蛋白、牛血清白蛋白、血蛋白等,其中以牛血清白蛋白最为常用。 (2)多肽类聚合物:是由人工合成的多肽聚合物,也是一类良好的载体,常用的有多聚赖氨酸。 (3)大分子聚合物:聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羧甲基纤维素(CMC)等皆可与半抗原结合,加入福氏完全佐剂可诱导动物产生良好的抗体。 连接方法: 物理法:是用物理吸附法将载体与半抗原连接,其原理是通过电荷和微孔来吸半抗原,吸附载体主要有PVP和CMC等; 化学法:是利用某些功能基团把半抗原连接到蛋白质类或多肽类聚合物载体上。不同的半抗原应选用不同的方法进行连接。 根据化学基团不同,连接方法主要有以下几类: 带游离氨基或羧基以及二种基团皆有的半抗原:羧基可用混合酸酐法和碳二亚胺法与载体氨基形成稳定的肽键,带氨基的半抗原则可与载体羧基缩合。 带有羟基、酮基、醛基的半抗原:不能直接与载体连接,需要用化学方法如琥珀酸酐法、O-羧甲基、羟胺法等方法将之转变为带有羧基的 半抗原衍生物后才能与载体连接。 带有酚基的半抗原,可用一氯醋酸钠法或重氮化的对氨基苯甲酸法,生成带有羧基的半抗原衍生物。 谢 谢 请提出您的宝贵意见! Ab1 Ab3 Ab4 单克隆抗体 抗原 Ab1
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