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季的花药离体培养总结
课题2 月季的花药培养
植物的花药培养在育种上有什么意义?
缩短了育种周期,为新品种的培育开辟了新途径。
花的结构
花丝
花药:囊状结构,内有很多花粉
花粉是由花粉母细胞(即小孢子母细胞)经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。
花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期等阶段。
(一)被子植物的花粉发育
雄蕊
(一)被子植物的花粉发育
1花粉母细胞(2n)
4个小孢子(小孢子
四分体)(n)
减数分裂
有丝分裂
1个花粉管细胞核(n)
1个生殖细胞核(n)
有丝分裂
2个精子
单核居中期(n)
单核靠边期(n)
注意:
①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成)
②三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个精子。
③两个精子和一个营养核的基因型相同。
(二)产生花粉植株的两种途径
形成原因:主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比
体细胞胚(胚状体):
在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)。
(三)影响花药培养的因素
1、材料的选择
不同植物
同一植物的不同生理状况(花期早期-初花期)
合适的花粉发育期(单核居中期与靠边期之间)
此外,植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等
2、培养基的组成
(一)材料选取
通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。
●最常用的方法:醋酸洋红法。
●某些植物的花粉细胞核不易着色,采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
月季的初花期。
选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。
二、材料的消毒:
月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较,二者有何不同?
在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗
三、接种和培养
剥取花药
接种花药
培养
分化培养基培养
鉴定和筛选
不要损伤花药?
要彻底除去花丝?
常常会出现染色体倍性的变化?
每个培养瓶接种 (7~10 ) 个花药?
花药长出愈伤组织还要转移到哪?
主要原因是营养核和生殖核融合造成的
植物组织培养技术与花药培养技术的异同点
项目
相同点
不同点
植物组织培养 技术
离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。
外植体为体细胞,染色体数无需加倍。
花药培养技术
取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。
(2012全国卷新课标版)(15分)为了探究6-BA
和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响,
某研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA,配制
成四种培养基(见下表),灭菌后分别接种数量
相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体,在
适宜条件下培养一段时间后,统计再生丛芽外植
体的比率(m),以及再生丛芽外植体上的丛芽
平均数(n),结果如下表。回答下列问题:
(
1)按照植物的需求量,培养基中无机盐的元素可分为 和 两类。上述培养基中,6-BA属于 类生长调节剂。
2)在该实验中,自变量是 ,
因变量是 , 自变量的取值范围是 。
3)从实验结果可知,诱导丛芽总数最少的培养基是 号培养基。
4)为了诱导该菊花试管苗生根,培养基中一般不加入 (填“6-BA”或“IAA”)。
生长素
细胞分裂素
细胞分裂素
IAA浓度
丛芽外植体的比率及丛芽平均数
0~0.5mg/L
1
6-BA
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